分选后共培养会有影响么？MLR怎么做？

磁柱本身是不带磁性的。 2、T细胞需要新鲜最好 3、有IL-2可以，没有也行，T细胞培养基中最好有2-ME

磁珠不会影响，如果看MoDC对T细胞活化，可以用新分选的，或者分选活化后又养了段时间，因为T细胞活化再到静息需要时间。培养T细胞除了血清/双抗需加HEPES/NEAA/Paryvate/glutamin/2-me，IL-2诱导分化，IL-7促进存活，供参考。

磁珠之间不会有影响。最好是用新的分离的T细胞，T细胞培养基中除了要加FBS 和双抗之外，还需要加HEPES,Pyruvate ,和b-mecraptoethanol

磁珠应该不会相互吸引，但是T细胞生长会抱团，不是磁珠的问题。如果原代T细胞体外培养最好14天以内用。

一般来说，只要抗体和磁珠没有太过量，不足以引起ADCC，不至于封闭空间位阻的话，磁珠阳选做MLR是没有问题的。磁珠只是有活性铁的珠子，本身不在磁场中是不会有磁性的。 MLR反应用的T细胞最好是新鲜制备的，培养一段时间如果没有额外刺激的话会导致T细胞活性的下降，如果有CD3/CD28刺激或者其他刺激因素存在的情况下细胞活力可以保持几天甚至增强，T培中最好有2ME和IL-2，有利于T细胞的存活。最多可以培养的时间没有计算过，我培养过2周的，如果没有刺激是不需要传代只需要3天半量换液的，有刺激细胞增殖了才考虑传代。

磁珠分选后要进行培养尽量使用阴选试剂盒，这样分选出来的细胞不带有磁珠，不影响后续的培养，或者是选择可以进行磁珠解离的阳选试剂盒，尽量让需要培养的细胞不带有磁珠，细胞如果真的带有磁珠，也需要去了解特定的磁珠是否会影响后续的实验；MLR是将无关个体的淋巴细胞混合在一起，由于淋巴细胞上的MHC不同，互相刺激，导致对方的淋巴细胞分裂增殖和转化。所以需要确认获得的是无关个体的淋巴细胞

不会有影响，磁珠不会相互吸引的。 T细胞不必要用新鲜的，可以持续加IL2进行诱导。