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肿瘤干细胞的分离纯化

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

简介

分离肿瘤干细胞的主要思路与分离成体干细胞的思路类似,包括根据特殊的表面标记分子进行分选和 SP 细胞分离,其中依赖干细胞表面标志分离的可供选择的分选系统为免疫磁珠分选系统和荧光激活细胞分选技术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)。

原理

免疫磁珠分选法分离纯化肿瘤干细胞的原理是利用细胞特有的表面标志,然后将抗体包被磁珠,制成免疫磁珠,再将细胞悬液与磁珠共孵育,由于其表面标志与磁珠上特异的抗体结合从而将被吸附在磁珠上,其他细胞则不被吸附,由此可分离出肿瘤干细胞。

荧光激活细胞分选法分离纯化肿瘤干细胞的原理是携带荧光素标记的待检细胞混悬在一定容积的上样缓冲液中,进样后仪器将细胞悬液制成以单细胞排列的微细流束。荧光标记的细胞通过仪器的激光束激发照射时,产生的荧光信号通过敏感的光电倍增管被光学系统检测到,并输送到计算机进行分析处理。

来源:丁香实验团队

操作方法

免疫磁珠分选法

分离肿瘤干细胞的主要思路与分离成体干细胞的思路类似,包括根据特殊的表面标记分子进行分选和 SP 细胞分离。

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分离肿瘤干细胞的主要思路与分离成体干细胞的思路类似,包括根据特殊的表面标记分子进行分选和 SP 细胞分离。

流式细胞仪法分选法分离纯化 SP 细胞

分离肿瘤干细胞的主要思路与分离成体干细胞的思路类似,包括根据特殊的表面标记分子进行分选和 SP 细胞分离。SP(side population)细胞又称为边缘群细胞。用结合 DNA 的荧光染料 Hoechst 33342 处理细胞,利用肿瘤干细胞可将染料泵出细胞的性质,经过荧光活化细胞分选系统(fluo-rescence activated cell sorting,FACS)的分析,将不被染色或

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