外周血单个核细胞（PBMC）

1.我做过小鼠单核细胞分化DC，分离纯化后第一天就加因子了，单核培养周期看分化的细胞种类有关，我诱导养的鼠DC都养过14天的还存活着，破骨分化的就不知道了。铺板1640+FBS是所有分化都需要的，但血清浓度看有的资料说对分化速度有影响（具体以前在丁香看到过可以版内搜索找找），诱导破骨贴壁情况就不知道了。我养DC时贴壁情况这样的先贴壁后悬浮

破骨细胞没诱导培养过，刚看了下资料，猜测你估计是用血液单核细胞诱导法诱导分化培养，这个就需要贴壁的单核细胞，单核细胞是半贴壁的细胞，可以只加培养液不加血清诱导因子于培养箱孵育1-2h，然后用PBS慢慢清洗去除不贴壁的淋巴细胞和其他杂细胞杂质等，这样六孔板下单核细胞纯度就高了，看了你这图片，铺板密度有点低啊，以前做过2-undefined10^6/ml铺孔PBMC分离单个核细胞，然后洗涤纯化，单核纯度很高。然后加因子血清诱导就靠自己找资料做了

当然大的是啊，小的是其他杂细胞（血小板等），去除？那就用免疫磁珠法提纯去除。贴壁的是单核细胞，不贴壁的是淋巴细胞，还有PBMC是人外周血单个核细胞包括单核细胞和淋巴细胞等，六孔半下既有悬浮又有贴壁（按照这个特性可以把单核细胞跟淋巴细胞分离开来），铺板数量么，你要从pbmc里分化培养什么？CTL？DC？NK？ PBMC传代培养？单核不会了，只能分化。淋巴可以增殖培养。