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微波修复时是否该阻断?

相关实验:细胞凋亡检测实验

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tao0129

我做到石蜡切片,用的微波修复,但没有阻断,是否该阻断?封闭后也没有用PBS洗
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1 个回答

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赵栋2012

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1. 微波修复的目的是什么?在免疫组化中是用来抗原修复,暴露抗原决定族,利于抗原抗体反应;而罗氏细胞凋亡试剂盒说明书中应该也没有提及抗原修复吧?2. TUNEL检测细胞凋亡原理是用来测定DNA断裂的3‘-OH和TDT-dUTP结合,他们的结合反应不是抗原抗体反应原理,该方法的关键是如何使TDT-dUTP等试剂充分进入细胞核内进行反应,所以应该有细胞通透这一步骤,用蛋白酶K、Triton等均可。3. 假阳性多的原因有很多:POD封闭不全、DAB显色时间过长等原因。
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