请问annexin V与PI和与7AAD有何区别？

Annexin V分子量35KDa左右，是一种钙离子依赖性的磷脂结合蛋白，当细胞发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸会从膜内外翻，Annexin V与外翻后的磷脂酰丝氨酸具有很高的亲和力，此时将FITC这种荧光蛋白标记在Annexin V上，便可以利用流式细胞仪进行检测。

PI是核酸染料，不能穿过活细胞膜，当细胞膜出现破损时，PI可进入细胞并结合核酸。7-AAD （7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD标记DNA的强弱，将细胞分为三群：7-AAD强为死亡细胞，7-AAD弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD同PI 有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的最佳替代品，可与Annexin V- PE联合使用

PI：荧光染料PI（碘化丙啶）是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测，英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物，在嵌入双链DNA后释放红色荧光。

7AAD:是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD标记DNA的强弱，将细胞分为三群：7-AAD强为死亡细胞，7-AAD弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。

PI和7AAD是两种不同的细胞核染料，最大激发/发射波长分别为PI=535nm/615nm，7AAD=546nm/647nm，他们都可以分别和Annexin V联合使用区分早晚期凋亡。