细胞通透的原理、通透剂的浓度、孵育时间及其配制方法？

1.蛋白酶K是消化膜蛋白，从而起打孔作用，增加膜通透性，使rTDT酶、抗体易透过细胞膜进入细胞反应；2.蛋白酶K一般工作液浓度为20 ug/ml ，但浓缩液可配制1~10 mg/ml ，可用PBS配制，也可用蛋白酶K缓冲液（100 mM Tris HCl pH8.0+50 mM EDTA）；3. 蛋白酶K反应时间一般为10~30 min，具体时间长短与切片厚薄有关，4 um 左右的片子可以用10 min，但30 um 左右的可用30 min，最终通过摸索最佳时间。过长易脱片、过短起不到通透效果。