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科研学霸天团,48小时有问必答
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求助:药物比如褪黑素和肿瘤细胞的共培养,浓度梯度一般怎么分组为好?
青云羡鸟飞KN22
预实验先从10倍稀释开始,进行相应的验证之后选择良好继续细分
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问
求乳腺癌紫杉醇耐药株怎么做啊? 每次加完药几天后就不行了
念冬寒
每次加药72小时后撤药,待单克隆长起来后,给药浓度加倍,重复步骤(我是这样成功的,不过是别的癌种)
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问
动物实验组织学层面如何检测细胞凋亡,最好的方法是什么?
balalaLy
切片可以使用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡
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问
细胞长得咋样可以传代/铺板/药物处理/收样等时机。有养细胞图片最好。
申东熙老伯
看细胞的融合度以及生长速度,细胞状态好融合度80-90%就可以传代。铺板的话要根据接下来做的实验来定,最好细胞计数之后再铺板。
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问
请问这是什么污染?细胞越多白点越多,培养基没变混浊
毛利小五郎的徒弟
细胞看着像分化,白点可能是蛋白析出
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问
不是消化酶消化下来之后需要用不含血清的培养基终止消化吗?
ZIWENHUA
消化酶只是媒介,不用绕弯路,直接离心即可
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问
如何从血液中提取出T原代细胞?
毛利小五郎的徒弟
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。
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问
肝细胞CPT1A,CPT2,ACO,ACC1和FAS分别的作用
loveliufudan
这些都是肝脏组织中脂质摄取转运相关分子,跟脂代谢密切相关。
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问
RNA-FISH
毛利小五郎的徒弟
一般长链可剪切位点比较多,短链灵敏度高
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问
求助|有无大佬分享一下BV2细胞的分型免疫鉴定经验
麻黄连翘赤小豆
M1促炎M2抗炎,LPS和正常组肯定有区别表达,在此基础上,检测白介素6,12;4,10,13,炎症相关信号的激活也能说明一些问题
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问
PMA诱导THP-1贴壁却不分化?
毛利小五郎的徒弟
做实验时也是尽量要避光,你降低细胞密度会分化
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问
血管内皮通透性
loveliufudan
楼上说的很好,这里补充一个监测方法:还可以用电阻抗仪监测跨内皮细胞电阻(TER)来测量通透性。
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问
免疫荧光,BSA封闭液用水配行不
Piccccbo
直接用水配就行了,按体积比就行,相当于稀释,看你干什么用,如果还要做PCR的话,建议最好用去离子水或者超纯水
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问
求助RAW264.7细胞培养,复苏后由亮变暗像细胞碎片,是什么问题呀?
麻黄连翘赤小豆
这浮上去的都是细胞尸体,都没有圆圆的巨噬细胞形态,重新复苏新管子
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问
风险模型-生存分析
Piccccbo
看图不能直接判断风险模型的好坏,起码需要区分度和校准度,判断和预测值之间的差异;此外,净重分类指数NRI一般也是必须的。
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问
可以用培养基作为药物溶媒吗?怎么保证所溶药物是无菌的?
cubeamy1905
要看你所使用药物的性质噢,如果易溶于水,直接溶在培养基是没问题的,如果不易溶于水,则需要用有机溶剂,比如乙醇或dmso先溶解成保存液,再稀释到培养基里变成工作液。我们一般认为包装未拆封的试剂都是无菌的,在超净工作台里拆封溶解即可。如果使用的是外部拆封的试剂,则溶解后需要通过滤器过滤除菌。
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问
Chelex-100提取DNA,进行孵育放入冰箱保存,第二次使用,需要二次孵育吗?
毛利小五郎的徒弟
冰箱设置多少度?理论上不需要二次孵育
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问
细胞荧光染色背景很深
麻黄连翘赤小豆
缩小曝光时间就可以让背景变浅,再调整对比度
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问
Renca细胞长成拉丝状
毛利小五郎的徒弟
可能是消化过程中特定的酶没有被破坏
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问
APPswe/N2a细胞可以用来研究阿尔茨海默中的tau磷酸化吗
毛利小五郎的徒弟
是的,如果有药物双向抑制,那么冈显然不合适,现在一般用水合氯醛造模
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