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科研学霸天团，48小时有问必答
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问
请问一下，细胞传代一般传到第几代就和原代细胞差别较大了呀？或者说可以从哪些方面判断细胞特性是否改变呢？
loveliufudan
细胞在传代过程中会发生一些改变，这些改变可能包括细胞生长速率的变化、形态特征的改变、细胞表型的变化、基因表达模式的变化等，这些变化会导致细胞特性的改变。一般来说，细胞传代的代数越高，细胞的特性差异越大。一般认为，在进行细胞实验时，可以传代3~15代的细胞使用，但具体传代多少代需要根据不同的细胞系和实验要求来确定。一些细胞系可以传代很多代而不发生明显的改变，而另一些细胞系只能传代很少的代数。判断细胞
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问
请问一下，复苏的细胞量太多了，第二天就需要传代，会影响细胞状态吗？
loveliufudan
复苏的细胞数量过多，如果不及时传代，会导致细胞密度过高、营养物质不足、代谢产物积累等，从而影响细胞状态和生长状况。因此，第二天需要传代的情况下，最好不要等到细胞密度过高才进行传代，应尽早进行。细胞密度过高会导致细胞之间竞争养分和空间资源，细胞生长受到限制，细胞进入停滞期或凋亡状态。另外，过高的细胞密度还会增加细胞间的接触和摩擦，增加细胞的损伤和死亡风险。细胞密度过高还会导致代谢产物的积累，如乳酸和
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问
求助各位老师，3T3-L1脂肪细胞MTT怎么做？用脂肪前细胞和成熟脂肪细胞各做一遍吗？
dxyc42u
脂肪细胞做MTT一般做成熟脂肪细胞就行
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问
做中药含药血清，如何通过预实验来确定合适的给药剂量呢?
毛利小五郎的徒弟
可以在剂量梯度实验，通过梯度给药得出合适剂量
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问
细胞培养的相关问题？
毛利小五郎的徒弟
培养基变黄就是细胞代谢的产物太多了，所以影响细胞培养。
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问
细胞传代1次之后就开始死亡是为什么？
毛利小五郎的徒弟
可能是营养不够了，建议加血清试一下。
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问
细胞培养液变黄原因及会影响细胞状态吗？
毛利小五郎的徒弟
少量清澈发黄是不影响的，可以继续培养。
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问
血小板活化是可逆的吗，可以使用台式液使其恢复静息状态？
毛利小五郎的徒弟
理论上是不可逆的，活化后不能恢复静息状态。
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问
对于生物医用高分子材料，从哪些方面评估其对细胞的毒性和生物相容性的影响？
huarenqiang5
从血液反应、免疫反应及材料反应进行评估。
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问
牛血清白蛋白（无脂肪酸）水浴锅加热温度可以高于55℃吗，或者最高可以多少度
huarenqiang5
水浴锅加热温度可以高于55℃，但建议<60℃，因为60℃时就可令其变性。
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问
检测培养细胞的HBV复制情况应该检测细胞内的还是培养液中的Hbv
dxyc42u
细胞内和培养液中的Hbv都检查，主要看细胞内的Hbv水平
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问
研究HBV的复制应该用哪种肝细胞合适
asswei
体外研究一般用克隆的病毒基因组转染肝肿瘤来源的细胞系后可实现HBV复制和病毒颗粒组装,或采用人原代肝细胞(PHH)来源的。
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问
细胞培养过程中，PH突然变化快的原因有哪些？
asswei
培养过程中，生长期细胞代谢旺盛，产生CO2与乳酸，导致pH的下降，而后随着稳定期、衰亡期的到来，CO2释放多于生成，乳酸有可能有所消耗，培养液pH值逐渐上升。
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问
细胞培养过程中，发现培养皿壁上有一些发黄的絮状物，这些是什么，请大神解惑？
huarenqiang5
考虑可能是纤维之类的东西，建议处理一下。
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问
由于时间原因，新鲜的抽脂脂肪组织来不及提原代保存在-80度冰箱该怎么保存？是直接把组织放进冰箱还是加pbs或者培养基泡着？
huarenqiang5
脂肪组织以PBS清洗，之后置于冷冻保存液中，冷冻保存液中含有70%的小牛血清20%基甲基亚芬10%的培养基封装在5ML的冷冻管之中，之后置于零下80°的容器中经过程序性降温后保存在零下196°的液氮中。
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问
单个B细胞制备单克隆抗体
loveliufudan
进行流式细胞分选时，选择特定的荧光标记可以区分不同类型的免疫球蛋白（Ig），例如IgM和IgG。在某些实验中，需要对不同类型的B细胞进行分离和分析，以了解它们在免疫应答中的不同作用。对于只需要分离IgG的B细胞的实验，原因可能是因为IgG是较为常见的免疫球蛋白类型，也是典型的记忆性免疫应答的产物。在初次感染后，B细胞会分泌IgM抗体，然后在IgM介导的清除病原体过程中，一些B细胞会转化为IgG产生
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问
请问有做Pink1/Parin通路的嘛，想请问用的那个抑制剂
asswei
可通过抑制线粒体自噬的方法抑制通路的活性，如Mg132等
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问
细胞毒性实验A549细胞和L02细胞有什么区别？
毛利小五郎的徒弟
A549的敏感性更高一些，应用范围更广。
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问
L谷氨酰胺在细胞培养时会发生降解吗？如果会发生那么降解率是多少？
毛利小五郎的徒弟
一般很少发生降解的，与你培养的细胞相关，如果细胞会分解的话就会降解
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问
培养皿挂不住细胞怎么办？
排球不睡觉
如果是细胞贴壁能力差，可以用包被液处理培养皿以提高结合能力
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