用4T1做MTT实验，各浓度梯度的抗肿瘤药物的细胞存活率都在100%左右，且没有梯度和线性变化。

各位大佬们，MTT实验做了一个多月了都没做出结果，求求帮助！

1.我用的是4T1细胞，最开始是用1640来进行培养和做MTT，发现细胞状态不好，做出来的结果有些可以有些不行，我老板说是细胞状态的问题，但我怀疑是培养基的问题。

2.然后我就向别人要了一管新的细胞，用DMEM来培养和铺板，结果给DOX的几个梯度浓度细胞存活率都在100%左右或以上了，是不是不能用DMEM来做MTT啊。

3.实验步骤：4T1细胞以5×1undefined4个/ml的浓度，每孔100ul，12h过夜贴壁，加180ul无血清培养基和20ul梯度浓度的药物，培养24和48h，去除培养基加100ul无血清培养基和20ulMTT，孵育4h,去除再加150ulDMSO，振荡15min，在490nm测。

4.其他问题：（1）无血清培养基要加双抗吗？（2）在加药之前需要先用无血清培养基培养12h让它同步化再给药吗，我看有的人说要这样处理（5）吸光度值大是不是我给的细胞数量太多了？

5.下图是我的MTT吸光度值和细胞存活率