bamboopiggy
换转膜的三明治夹子,结果不可信,没有继续往下做的必要了,当然,看看抗体是不是能用,也是可以的。
天一湖医者
换成半干转的方法,但是注意半干转更要确保没有短接气泡,而且时间不能过长,半干转的发热量很大。我不清楚你的蛋白是不是需要活性,如果遇热失活那就不能用这种方法。检查一下你的三明治结构夹得怎么样,尤其是膜及滤纸的边缘是不是有短接的地方,这个是最容易出现的问题。另外膜和胶之间是不是有气泡,不推荐用外力去擀压膜和胶,推荐用缓冲液润湿膜和胶之后,像做切片盖盖玻片一样从一边盖下赶出气体。要绝对确保没有短接和气泡,不然很容易出现转膜不完全的问题。