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用克隆化基因在体外合成的蛋白质分析 DNA-蛋白质相互作用
最新修订时间：
简介
体外合成的蛋白质对于测定一个克隆的基因是否编码一个特异的DNA结合蛋白， 以及分析DNA-蛋白质相互作用都是极为有用的。为了检测DNA的结合能力，可将标 记的蛋白质与特异的DNA片段共温育，用非变性丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质-DNA复 合物与游离的蛋白质分离开来。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版
来源：丁香实验
操作方法
1) 用合适的限制性内切核酸酶切割0.5μg含有结合位点的质粒DNA (假设一个5 kb 的质粒），产生一个长为150〜700 bp的片段，这个片段的大小和内切酶切出的其他片段的大小不同。用酚抽提及乙醇沉淀纯化。2) 建立以下15μL的结合反应：5μL H2O3μL5×结合缓冲液5μL DNA (DNA 片段各 9 nmol/L)1μL 10 mg/mL poly (dl-dC) . poly (
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