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第一步:选择目标基因 首先需要选择要过表达的目标基因。这个基因可以是已知的,也可以是未知的。如果是已知的基因,可以通过文献调研或数据库查询来获取该基因的序列信息。如果是未知的基因,可以通过基因组测序等方法来获取该基因的序列信息。
第二步:构建表达载体 表达载体是将目标基因导入到细胞中的工具。常用的表达载体有质粒、病毒和细胞质注射等。在构建表达载体时,需要将目标基因的序列克隆到载体中,并加入适当的启动子、终止子和选择标记等元素,以确保基因能够在细胞中正常表达。
土井挞克树
一般都是用生物pGMLV高效shRNA干扰载体转染,然后进行干扰过表达
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干扰的siRNA可以和过表达的质粒同时转染细胞,然后72h收蛋白wb
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