【求助】做过表达如何选剪切体？
丁香园论坛
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最近需要做过表达，有以下几个问题：
1 克隆CDS,还是cDNA?
2 该蛋白有两个剪切体，选那个呢？
3 哪个数据库有蛋白表达谱？
谢谢
1 克隆CDS,还是cDNA?
2 该蛋白有两个剪切体，选那个呢？
3 哪个数据库有蛋白表达谱？
谢谢
你的概念比较模糊：
1：克隆的时候当然是逆转录形成CDNA后去PCR克隆
2：选哪个剪切体要看你的实验目的，是做一个还是两个都做
3：看看www.genecards.com和http://www.wikigenes.org有没有蛋白表达谱了
1：克隆的时候当然是逆转录形成CDNA后去PCR克隆
2：选哪个剪切体要看你的实验目的，是做一个还是两个都做
3：看看www.genecards.com和http://www.wikigenes.org有没有蛋白表达谱了
thanks!
可能我的问题没说清楚, 我的问题是：
１ 我想做基因过表达，怎样设计 primer呢？从ATG开始，还是ATG上游，如果从上游，那么距离ATG多远？
２ 我的蛋白有两个剪切体，我做的组织是脑，所以想知道那个剪切体在脑表达。不过，从你给我的网站没找到剪切体基因表达谱。
谢谢
１ 我想做基因过表达，怎样设计 primer呢？从ATG开始，还是ATG上游，如果从上游，那么距离ATG多远？
２ 我的蛋白有两个剪切体，我做的组织是脑，所以想知道那个剪切体在脑表达。不过，从你给我的网站没找到剪切体基因表达谱。
谢谢
1. 需要过表达，看你要连接的载体的信息来决定了。一般情况下，从ATG开始即可，一般表达载体上带有很强的promoter和TATA box
2. 如果没有找到，那可能没有人做，你需要设计特定的引物去做RT-PCR才能确定哪个剪切体在脑表达。
2. 如果没有找到，那可能没有人做，你需要设计特定的引物去做RT-PCR才能确定哪个剪切体在脑表达。
thanks again!
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