Th17刺激分化总是失败，不知道原因在哪？

各位老师同学好，本人最近做Naive CD4 T细胞刺激分化成Th17细胞的实验，但是结果却不太理想，刺激分化为Th17细胞比例较低(4%左右)，相反对照孔(即不加任何细胞因子)Th17比例有时候反而比加细胞因子的孔更高，原因可能是整个实验Th17根本没有刺激出来。我用的是近岸蛋白商家的细胞因子，24孔板加抗CD3和抗CD28包被，鼠源性IL-6和IL-23的浓度为40ng/ml，人源性TGF-β浓度为5ng/ml，外加每孔加抗IL-4和抗IFN-γ，对照孔除了有抗CD3和抗CD28包被外不加任何处理。我看有的文章会放对照组，有的文章不放，只放加细胞因子处理的组和加细胞因子药物处理的组，不知道是不是他们对照组比例也很高，所以不放在论文里面。园里可有老师或者同学做过此类实验，有没有相关经验可以分享给我，非常感谢！