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T细胞亚群的诱导分化

实验分类:

免疫学实验

最新修订时间:

简介

T淋巴细胞是介导细胞免疫的关键细胞,在机体对抗外来抗原与病原体入侵过程中发挥着重要作用。


T淋巴细胞主要由CD4+T细胞和CD8+T细胞组成,CD4+T细胞又被称为辅助性T细胞(helperT cell,Th),其识别抗原受MHCII类分子限制,在功能上可辅助B细胞产生抗体,辅佐CD8+T细胞免疫应答,以及通过分泌各种细胞因子发挥免疫调控功能。


根据表达的转录因子及分泌细胞因子的不同,CD4+T细胞又分为Th1、Th2、Th17、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及滤泡辅助T细胞(Tfollicular helper cells,Tfh)等。


CD8T细胞又称杀伤性T细胞(cytotoxic T cell,CTL),其识别抗原受MHCI类分子限制,在功能上可杀伤病毒或胞内细菌感染的靶细胞以及肿瘤细胞等,是细胞免疫的重要效应T细胞。

原理

Th1和Th2细胞的分化诱导的基本原理是抗原特异性Th细胞反应常用以下两种模型。


一是以同种异型细胞作为抗原诱导同种异型T淋巴细胞反应;另一种则为可溶性抗原在同型的抗原提呈细胞提呈下,诱导TCR转基因小鼠来源CD4T淋巴细胞反应。


Th1的诱导需要加入IFN-Y、IL-12与抗IL-4,而Th2的诱导需要加入IL-4、抗IFN-y与抗IL-12。在相应的培养条件下诱导4天以上即可培养出相应的Th1或Th2细胞。


Th17细胞的分化诱导的基本原理是先将Th0细胞进行活化,同时加入TGF-β、IL-6、抗IFN-y和抗IL-4等相应的条件促进Th17的分化。


另外有些对Th17的分化发育与功能具有重要作用的细胞因子,如IL-23和IL-21,也可被加人到诱导分化的过程中。


调节性T细胞的分化诱导的基本原理是Treg细胞可以通过初始T细胞活化,同时受到抗CD3抗体、抗CD28抗体、IL-2、TGF-β和IL-10等共刺激信号的刺激诱导产生。


滤泡辅助性T细胞的分化诱导的基本原理是CXCR5是Tfh迁移、定位重要的“转运分子”(traffickingmolecules),也是Tfh细胞重要的表面标志,而Bcl-6目前认为是可能控制初始T细胞分化为Tfh的转录因子。

来源:丁香实验团队

操作方法

Th1和Th2细胞的分化诱导

初始CD4T细胞(即Th0细胞)在特异性抗原或特异性活化剂的作用下活化、分化为不同的Th细胞亚群,如Th1、Th2、Th17等。Th1细胞通过分泌IL-2、IFN-y和TNF-β等细胞因子介导细胞免疫效应,在诱发以炎症反应为特征的器官特异性自身免疫病、器官移植排斥反应和抗感染免疫中发挥重要的作用。Th2型细胞通过分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13等细胞因子介导体液免疫,Th2

Th17细胞的分化诱导

一类CD4T细胞主要分泌IL-17,表达控制其分化的独特的转录因子-孤独受体(orphan nuclear receptor,RORYt)。Th17细胞分泌IL-17,刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞和巨噬细胞等分泌多种细胞因子,趋化和募集中性粒细胞和单核细胞,诱导局部炎症反应。因此,Th17参与了炎症反应、感染性疾病以及自身免疫性疾病的发生发展。另一方面,IL-17刺激上皮细胞、角朊细胞分泌防

调节性T细胞的分化诱导

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一类具有较低增殖能力,能够抑制免疫反应的细胞群,在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面发挥重要的作用。Treg细胞在体内外具有调节功能,根据其表面标记、产生的细胞因子和作用机制的不同,Treg细胞可分为两类,一类是自然Treg细胞,即天然生成CD4+Treg细胞,另一类为适应性Treg细胞,它包括Tr1细胞、T

滤泡辅助性T细胞的分化诱导

滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh)是主要负责辅助B细胞的T细胞亚群。Tfh上表达的CD40Lhi和ICOShi分别通过与B细胞上CD40和ICOSL结合,以及Tfh所分泌的IL-21,在刺激B细胞增殖、分化以及免疫球蛋白类别的转换中起着十分重要的作用。此外,表达CXCR5的Tfh在淋巴滤泡处产生的CXCL13趋化下,被募集到淋巴滤泡并与B细胞共定位和相互

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