人外周血树突状细胞的体外扩增。

人外周血树突状细胞(DCs)的体外扩增通常需要从外周血单个核细胞(PBMCs)中分离出CD3+T细胞，并在培养基中添加刺激因子和生长因子，以促进DCs的分化和增殖。以下是一种常用的人外周血DCs体外扩增方法：

1. 收集外周血单个核细胞(PBMCs):从健康人体内采集外周血，并通过密度梯度离心法分离出PBMCs。

2. 分离CD3+T细胞：使用磁珠分选法或流式细胞术，从PBMCs中分离出CD3+T细胞。

3. 培养基准备：将含有重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的培养基准备好。这些因子可以促进DCs的分化和增殖。

4. 诱导DCs分化：将CD3+T细胞与准备好的培养基混合，并在37°C、5%CO2的孵育箱中培养。在培养的早期阶段，DCs会表现出未成熟的表型，如低表达的表面分子和酶活性。随着时间的推移，DCs会逐渐成熟，并表现出高水平的表面分子和酶活性。

5. 收集DCs:在培养的后期阶段，使用流式细胞术或磁珠分选法收集成熟的DCs。这些DCs可以用于进一步的研究或治疗应用。