免疫组化DAB染色时出现阳性结果，封片后无阳性细胞？为何？

有可能是染色物资不稳定，DAB显色产生的棕褐色沉淀物在封片后可能会发生颜色改变或退色。这可能是由于光照、氧化等因素引起的.。

可能有几个原因导致这种情况发生：

1. 显色反应不完全：DAB显色反应的持续时间可能不足以完全显色所有阳性细胞。如果显色时间过短或显色液浓度较低，可能会导致部分阳性细胞未能充分显色。

2. 染色物质的稳定性：DAB显色产生的棕褐色沉淀物在封片后可能会发生颜色改变或退色。这可能是由于光照、氧化等因素引起的。

3. 样本处理不当：如果样本处理过程中出现了问题，例如固定或脱水步骤不恰当，可能导致染色结果不稳定或退色。

为了解决这个问题，您可以尝试以下措施：

1. 增加显色时间：延长DAB显色的时间，确保充分显色。

2. 使用更浓的显色液：如果显色液的浓度较低，可以尝试使用更高浓度的DAB显色液。

3. 优化固定和处理步骤：确保样本的固定和处理步骤正确，使用适当的缓冲液和固定剂。

4. 重新制备样本：如果问题仍然存在，可能需要重新制备样本并重复染色步骤，确保样本质量和染色反应的稳定性。

假阴性结果：即此阴性结果不是真实的反映。假阴性结果又可分为两种情况：

　　（1）、切片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。出现这种情况，要麽是病理医生选择错了切片或抗体选错了，要麽是技术员选错了蜡块。获得正确的切片进行染色是获得正确结果的前提。由此表明：制作出合格的免疫组化切片不仅仅是技术员的事，病理医生也起着不可缺少的作用。

　　（2）、染色过程中的某一或某些环节出了问题。比如，组织未进行抗原修复，有的组织必须经过抗原修复才能检测抗原表达；或选用了只能用于冰冻组织而不能用于石蜡包埋组织的抗体；或一抗失效，虽然抗体失效在理论上是一个逐渐的过程，但偶尔也遇到突然失效的情况，抗体长期不用和/或已超过有效期是主要的原因。也可见于染色过程中漏掉了某一环节，如忘记加二抗或三抗，或用了两次二抗而缺少了三抗，或配制DAB时少了过氧化氢。为了避免这种简单的错误，有一种简单的方法：在三抗孵育结束时，将切片上的三抗甩在一张白纸上，在将配制好的DAB滴一滴在白纸的三抗上，观察是否出现棕色。如果出现了，证明三抗和DAB的配制过程没有错误。如果这种DAB再滴到切片上没有出现任何阳性信号，问题一定是出在三抗以前。如果纸上不出现棕色反应，问题肯定在三抗DAB或DAB的配制过程。