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透析袋选择应根据透析液容积选择,注意事项主要有两点:一点是透析缓冲液的选择,要选择能保持抗体稳定性的透析液,另一点是透析的时间和温度,一般来说全程在4℃条件下透析能保持抗体不被降解。
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透析过程需要注意以下几点:
1. 选择透析袋:需要选择合适的透析袋,一般建议选择分子量截留率为1000 Da的透析袋,以确保有机磷抗体能够完全透析出来。同时,透析袋的体积需要根据样品的体积进行选择,以保证透析的充分性。
2. 预处理透析袋:在使用透析袋前,需要进行预处理以去除透析袋中可能存在的污染物。常用的方法包括用纯水或0.1 M NaOH浸泡透析袋,然后再用纯水彻底洗涤。
3. 透析操作:将含有有机磷抗体的样品加入透析袋中,然后放入透析缓冲液中,进行透析。透析缓冲液的pH、离子浓度等需要根据实验需要进行选择。透析过程需要充分搅拌,以保证有机磷抗体能够充分透析出来。透析时间需要根据实验需要进行确定,一般需要透析2-4小时。
4. 收集透析液:透析过程结束后,需要将透析袋中的透析液收集起来,可以用质谱等方法检测有机磷抗体的去除率。
5. 最终处理:透析后的样品需要进行最终处理,如浓缩、冷冻保存等。
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有机磷透析中要注意与血液灌流联合应用,单纯透析效果有限
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有机磷抗体透析通常使用透析袋进行操作。选择透析袋的大小需要考虑抗体溶液的体积和透析袋的最大容量。
首先,确定你要透析的有机磷抗体的溶液体积。根据溶液的体积选择适当大小的透析袋。透析袋的容量应该能够容纳抗体溶液,并留出足够的空间供溶液在透析过程中的混合和扩散。
在进行有机磷抗体透析时,还有一些注意事项:
透析缓冲液选择:选择适合的透析缓冲液,通常是与抗体溶液相同或相似的缓冲液。确保透析缓冲液能够保持适当的pH和离子浓度,以确保透析过程中的稳定性和透析效果。
透析时间和温度:根据实验需求,确定透析的时间和温度。透析时间可以根据抗体的分子量和透析效果进行初步估计。温度通常选择在4°C或室温下进行,以减少抗体的降解和失活。
透析装置和操作:将抗体溶液转移至预先洗净的透析袋中,并将透析袋放置在透析缓冲液中。确保透析袋完全浸没在缓冲液中,以确保有效的透析。透析过程中可以轻轻搅拌或摇动透析袋,以促进溶液的混合和扩散。
透析液的更换:在透析过程中,可以考虑进行透析液的定期更换,以确保有效的去除溶液中的有机磷抗体。更换透析液的频率可以根据实验需求进行调整。
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