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在反转录制备cDNA的第一阶段,加入引物和模板RNA以后,需要65°℃变性处理5分钟,有什么作用?为什么?

相关实验:分子生物学实验

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洋芋小丸子YY


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3 个回答

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juyue2010

有帮助

主要是为了打开RNA中的二级结构,产物引物于模版结合

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土井挞克树

有帮助

可以去除退火过程中形成的干扰条带

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loveliufudan

有帮助

主要有以下作用:

使RNA变性:高温可以使RNA分子的二级结构变性,使其变成单链结构,这可以有助于引物结合于RNA模板的3'端。

促进引物与RNA模板的结合:引物通常结合于RNA模板的3'端,而高温能够使引物与RNA模板更紧密地结合在一起。

降低反应中的二级结构和自聚合:许多RNA分子具有复杂的二级结构和自聚合的倾向,这些结构和自聚合可以影响引物的结合和反转录酶的活性。高温变性可以打破这些结构和自聚合,从而提高反应的效率和准确性。

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