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关乎结肠炎的问题:
最近在研究DSS诱导的结肠炎模型,要分析里面的巨噬细胞等髓系免疫细胞,困惑的是,鉴于我之前的经验,巨噬细胞贴壁能力太强,染流式需要一直保持低温,所以我现在是假设结肠巨噬细胞也具有很强的黏附能力的思路去操作的,但是太麻烦了。所以我想问一下,有没有人之前研究过结肠巨噬细胞,常温染流式,会损失很多吗?能不能出结果,能出结果我也跟操作正常细胞一样去操作它了。
loveliufudan
一般而言,细胞的黏附能力会影响细胞染色后的流式细胞术分析结果。黏附能力较强的细胞在染色前可能需要额外的步骤来解除细胞的黏附,以免影响染色结果。
对于巨噬细胞的流式细胞术分析,您可以尝试以下方法来减少黏附的影响:
使用无血清培养基培养巨噬细胞,以减少黏附能力。
采用不同的细胞解离液,例如含有EDTA的PBS溶液,以解除巨噬细胞的黏附。
在染色前将细胞进行冷冻解冻,以减少黏附能力。
在流式细胞术前将细胞处理成单细胞悬液,并通过离心等方法去除不想要的细胞碎片和细胞聚集物,以获得更为纯净的细胞样品。
总的来说,温度较高时,巨噬细胞的黏附能力可能会增强,从而可能影响染色后的流式细胞术分析结果。但是,如果您在实验中仔细处理和优化样品前处理、细胞解离、染色条件等参数,一定程度上可以减少黏附的影响,并获得较为准确的分析结果。
土井挞克树
一般都是4摄氏度低温进行,温度太高很多细胞粘附在一起分选不出来。
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