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免疫组化实验血清封闭步骤?

相关实验:免疫组化

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dxy_iq3ufjb7

为什么免疫组化实验可以选择不用血清封闭,只用双氧水灭内源酶活性之后直接一抗孵育?

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5 个回答

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是TTT

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免疫组化主要是內源酶会导致背景高,双氧水灭活能解决这一问题的话,如果抗体特异性又比较高,确实可以不用血清封闭

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dxyc42u

有帮助

原理都差不多,都是减少非特性结合

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沫子大大

有帮助

血清封闭的目的是去除非特异性的吸附,用正常的非免疫动物血清封闭组织中的能和抗体结合的位点,减少非特异性的背景。一般来说都是要封闭的,但如果你的抗体特异性强可能不需要。你可以参考一下相同抗体文献,看一下使用说明等等。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

因为用双氧水也可以达到去除非特异性吸附的目的

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loveliufudan

有帮助

免疫组化实验中使用血清作为封闭剂可以防止非特异性的结合和背景信号。但是,使用血清也有一些缺点,例如:

批次效应:不同批次的血清可能具有不同的效果,导致实验结果不稳定。

交叉反应:某些抗体可能与血清中的其他蛋白质发生交叉反应,影响实验的特异性。

成本高:血清是实验成本中的一项重要费用。

相比之下,使用双氧水可以有效地灭活内源酶活性,减少非特异性结合和背景信号,从而减少对封闭剂的需求。因此,有些实验室选择不使用血清,而是使用双氧水进行样品处理,以减少实验成本和批次效应,并提高实验的特异性和准确性。当然,对于某些抗体和样品,可能仍然需要使用血清作为封闭剂以获得最佳的实验结果。

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dxy_iq3ufjb7user-title

我看到另一个帖子说,免疫组化有二步法和三步法,二步法不用血清封闭,三步法需要血清封闭

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