如果做多重免疫荧光染色，有两个抗体都是抗兔的，结合二抗之后是不是没办法分开这两个抗体标记的蛋白呀？😭

您好，请问你解决了这个问题吗😭

对，这样说不行的，需要两个不同种属的

如果你使用的两个一抗都是兔源的，并且使用相同的二抗进行检测，那么在多重免疫荧光染色的过程中，这两个抗体标记的蛋白可能会出现重叠，导致无法区分它们。

但是，你可以通过以下几种方法来区分这两个抗体标记的蛋白：

选择不同的荧光二抗：如果你的一抗都是兔源的，你可以使用不同的荧光二抗，比如使用抗兔IgG的荧光二抗和抗小鼠IgG的荧光二抗来标记不同的一抗。

相间分区染色：将细胞分成几个区域，在不同的区域分别使用不同的一抗和荧光二抗进行染色，然后观察不同区域的荧光信号，从而确定不同的抗体标记的蛋白。

串行染色：先使用一个一抗和荧光二抗进行染色，然后将这个荧光标记的蛋白解离，并用另一个一抗和荧光二抗进行染色，再次观察荧光信号，从而确定两个不同的抗体标记的蛋白。

总之，尽管使用两个兔源的抗体可能会造成染色信号的重叠，但你可以通过多种方法来区分这些信号，从而达到分别检测不同抗体标记的蛋白的目的。

是的，所以建议选择不同种属的抗体来进行孵育