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RNA中有DNA污染的处理方式有哪些

相关实验:分子生物学实验

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土井挞克树

RNA中有DNA污染的处理方式

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3 个回答

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huarenqiang5

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彻底去除基因组 DNA 最为可靠的方法是采用 DNase I消化。

DNase On Column Kit 可配合 HiPure RNA抽提试剂盒一起使用。组织/细胞样品经裂解液裂解后,转移至 HiPure RNA Column吸附 RNA,加入 DNase至柱子的滤膜中消化去除 DNA,然后加入洗涤液洗涤去除 DNase 和降解的 DNA。

1-20ugRNA经DNase 消化后,加入灭活剂变性失活 DNase,然后过柱进一步纯化去除 DNase、降解的 DNA 和其它杂质。

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loveliufudan

有帮助

在RNA样本中存在DNA污染可能会影响RNA分析的准确性,因此需要去除DNA污染。以下是几种去除RNA中DNA污染的方法:

DNase处理:DNase是一种酶,能够特异性地降解DNA,而不会对RNA产生太大的影响。因此,可以加入DNase来降解RNA样本中的DNA污染。DNase的反应条件需要根据具体的实验来确定,一般可以在RNA样本中加入适量的DNase和反应缓冲液,然后在适当的温度和时间下反应,最后通过加入DNase停止缓冲液来停止反应。

RNase-free DNase:由于一些DNase可能会含有RNase,因此使用RNase-free DNase能够保证RNA不会被降解。这种DNase已经经过处理,不会含有RNase,因此可以直接添加到RNA样本中进行反应。

硅胶柱净化:使用硅胶柱能够有效地去除RNA样本中的DNA污染。这种方法利用硅胶的亲和性来结合RNA分子,而DNA则不会结合到硅胶上。因此,通过将RNA样本加入到硅胶柱中,可以去除其中的DNA污染。

磁珠净化:磁珠净化是一种快速、高效的RNA样本净化方法,可以同时去除RNA样本中的DNA和其他杂质。使用磁珠净化可以在不损失RNA质量的情况下去除DNA污染。这种方法可以根据磁珠的类型和反应条件进行优化。

总之,在去除RNA中DNA污染的过程中,需要注意操作技巧和反应条件的控制,以保证RNA样本的质量和准确性。

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天一湖医者

有帮助

发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。 直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了. 因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。

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