求助，小鼠脾脏淋巴细胞的培养

你好，我看文献大家用pha、刀豆蛋白、lps。不知道是不是你想要的答案。另外我在搞小鼠脾脏淋巴细胞和干细胞的共培养……(˵¯͒〰¯͒˵)想交流一下请教一些问题可以么？

可以低速离心去除死细胞然后用少一些培养基重悬

小鼠脾脏淋巴细胞分离后，需要在含有一定浓度的细胞因子的培养基中培养，以刺激细胞增殖和活化。其中，IL-2是一种重要的细胞因子，它可以促进T淋巴细胞（包括调节性T细胞和效应T细胞）的增殖和存活。因此，你可以在你的培养基中加入适量的IL-2（例如10 ng/mL），并在37°C下5% CO2条件下培养24小时或更长时间。

另外，你还可以考虑加入其他一些细胞因子，如IL-4、IL-7、IL-15等，以增强不同类型的淋巴细胞的功能。具体的用量和时间需要根据你的实验目的和设计进行优化。

为了提取淋巴细胞和内皮细胞，可以加入b淋巴细胞刺激因子

可以按以下步骤进行：

1、取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37"C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2、细胞处理

1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液；

2) 1200- 1 500rpm离心3min，弃上清，收集细胞沉淀；

3)加 入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞接种至培养器皿中，置于37°C、 5%CO2、 饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4)待细胞状态稳定后， 培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。