果壳鹅鹅鹅
最近想要学流式 请问标记小鼠巨噬细胞用F4/80+CD11b和单用F4/80差距大吗?
可否只用F4/80+Arg1标记M2 F4/80+iNOS标记M1呢
一定要确切用两种抗体圈出巨噬细胞 才能测的M1/M2的比例吗
Fc阻断具体怎么用呀
有没有推荐的文献什么的…
土井挞克树
不一定完全用抗体圈出巨噬细胞才可以,得出比例经过计算也是可以成功的
huarenqiang5
一般需要用两种抗体圈出巨噬细胞 才能测的 M1/M2的比例。
loveliufudan
F4/80和CD11b是常用于标记小鼠巨噬细胞的抗体,其中F4/80主要标记巨噬细胞和某些其他细胞亚群,而CD11b标记更广泛,包括巨噬细胞、粒细胞和其他细胞类型。如果您只使用F4/80标记巨噬细胞,可能会遗漏一些CD11b+但F4/80-的巨噬细胞亚群,因此使用F4/80和CD11b双重标记可以更全面地圈出巨噬细胞。
在巨噬细胞的亚型鉴定方面,通常使用F4/80和其他标记如CD206、CD163、iNOS和Arg1等来鉴定M1/M2类型。使用F4/80+Arg1标记M2型巨噬细胞是可行的,但F4/80+iNOS标记M1型巨噬细胞时需要注意,因为iNOS在其他细胞类型中也可能表达,因此可能需要使用其他标记来区分不同的细胞类型。
为了确保测定M1/M2比例的准确性,最好使用至少两种不同的标记进行鉴定。这样可以更全面地圈出不同的细胞类型,并排除某些抗体可能产生的交叉反应。
Fc阻断是用于减少非特异性结合和背景信号的一种方法。在进行流式细胞分析时,Fc受体可以结合到未特异性标记的细胞表面抗体上,导致误报的阳性结果。为了减少这种背景信号,可以使用Fc阻断试剂将Fc受体占据,从而减少非特异性结合。通常建议在使用抗体前进行Fc阻断。
在学习流式细胞术方面,建议您先阅读相关教科书或手册,了解基本原理和技术。此外,您还可以参考一些研究论文或技术报告,了解不同类型细胞的鉴定和分析方法。
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