fengzhengbufei
我做一个个细胞爬片的免疫荧光,在荧光显微镜下可以看到细胞的DAPi和另一个颜色的荧光,但是在明场时却看不到细胞,请问我这是哪里没有设置对么?我换到细胞房平时看细胞的倒置显微镜下又能看到玻片上有细胞。求教这是怎么回事?可以怎么调一下?莱卡的荧光显微镜
毛利小五郎的徒弟
设置的波长可能不对,重新设置波长或者调节荧光补偿
dxyc42u
调回明场时候有没有切换光栅啊。
loveliufudan
在免疫荧光实验中,如果能够在荧光显微镜下看到细胞的DAPI和另一个颜色的荧光,但在明场显微镜下无法观察到细胞,可能有以下几个原因:
没有设置对相差干涉调节:在莱卡的荧光显微镜中,调节对相差干涉是非常重要的。对相差干涉可以增强样品的对比度,使得细胞和背景更加清晰。您可以尝试调整对相差干涉来增强细胞的明亮度。
显微镜聚焦不准:可能是在样品放置时没有确保样品在镜片上的位置水平,导致在聚焦时不能正确对焦。您可以重新调整焦距,确保样品处于聚焦面的中心。
显微镜照明光源问题:在进行明场观察时,显微镜的照明光源也非常重要。可能需要调整光源的强度或方向来获得更好的成像效果。同时,注意使用镜头和镜片清洁。
如果您能够在细胞房的倒置显微镜下观察到细胞,则说明您的样品中确实存在细胞,并且问题可能出在您的荧光显微镜上。建议您先检查荧光显微镜的各项设置,包括镜头、照明、对相差干涉等方面,以确保它们都正确设置。