如何设计Keap1基因的MSP或BSP引物

（1）将启动子序列中非CG二核苷酸的C全部转化为T（word可实现此功能）；
（2）序列载入premier5，按上述原则筛选引物。
（3）MSP引物中的一条往往是由需要确定，因此我们可以直接利用premier5筛选其互补引物。

（1）引物结合位点应该在原始序列中包含4个以上胞嘧啶来确保转化后的DNA的特异性。

（2）BSP引物不应包含CG二核苷酸，长度在25－30bp较为合适；MSP引物因为往往具有较高的GC比，长度应适当缩短。

（3）扩增片段一般认为不要超过650bp，以保证PCR的效率。

（4）对于MSP引物，应该包含3－5个潜在可甲基化位点，且引物的3端应该是一个潜在的可甲基化胞嘧啶，以得到最大化的特异性。

（5）MSP中，U引物与M引物应该具有接近的TM值。