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分离的蛋白是分子量200kd的,SDS-PAGE电泳的分离胶浓度多大合适?积层胶的浓度又该用多少?这么大分子量的蛋白容易作WB吗

相关实验:免疫荧光技术

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dxy_ktfkwtq

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3 个回答

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paj12345

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200KD,分离胶浓度8%比较合适,适当延长电泳时间,浓缩胶5%,只要操作得当,WB应该能跑出来。以下是本实验室的配胶成份表:

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小小小小小芳

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200kd的蛋白不好做,分离胶用7%,积层胶 3.5%。这种分子量蛋白建议加大电泳电转的电场强度和加长作用时间,但必须控制温度,保证低温电泳和电转。

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NatureBios

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200kd通常使用积层胶5%、6%的分离胶或预制胶4-12% 4-20%的,大分子量也不是说一定难做,和样本的制备,蛋白丰度,抗体,显影灵敏度等都有关系

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