分别收集EGF刺激0分钟、5、10、30分钟的1841乳腺癌细胞，提取蛋白质，分别进行酶解，然后采用iTEAQ中的不同核素标记。

采用iTRAQ试剂中的114Da、115Da、116Da和117Da不同同位素标记。将它们等量混合，采用抗泛酪氨酸磷酸化抗体进行免疫沉淀，再经过固相金属亲和层析（Im¬mobilizedmetalaffinitychromatography，IMAC）进一步纯化，最后用LC-MS/MS。

你的问题是什么？怎么收集？建议你倒着时间加egf，一个点一起收样

关于EGF刺激相关的乳腺癌细胞培养文章如下，你可以借鉴一下：https://wenku.baidu.com/view/e21850ff743231126edb6f1aff00bed5b8f3739c.html