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taq探针法,除了要设计普通的实时荧光pcr的引物之外,还要设计一条与探针结合的引物。taq探针法精度更高一些,但是普通实验的话,用实时荧光法就好,更方便一些。
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原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。
反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段.如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。
结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的。
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荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。并且,荧光定量PCR只能扩增100-300bp的片段,而普通PCR可以扩增长点的片段。
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