TaqMan荧光探针和SYBR Green荧光探针怎么选择？

TaqMan荧光探针和SYBR Green荧光探针更准确。

SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。因此，SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm，发射波长最大约为520nm。最大激发波长454nm。

SYBR是非特异性的荧光染料，不能识别特定的双链，只要是双链（包括非特异性扩增产物、引物二聚体等）就会结合发光，在临床上使用可能会有假阳性发生。但该方法容易建立实验体系，可进行熔点分析，通用性好，价格相对较低，在科研中使用比较普遍。TaqMan 检测到的是积累荧光，随着循环数的增加，释放出来的荧光基团增加，特异性较强，可进行多重qPCR分析，但成本较染料法要高一些，实验构建相对复杂

根据反应需求选择，一般荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段，如果不需要检测产物分子量大小，荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析