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为什么显影时候有多条带,而且带背景很深,杂带也很多,怎么进行改善?
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原因:1.抗体浓度过高
2.SDS造成非特异性结合
3. 二抗试剂的非特异结合
4.一抗特异性差
推荐采用已经经过厂家验证的WB应用抗体
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背景深、杂带多原因:1、一抗浓度高了;2、封闭时间短了;3、孵育完二抗之后洗脱时间短了;4、你的蛋白有没有其他亚型;5、你的一抗来源本来就有问题,买之前说明书上面杂带多么。