请问用CD24-FITC CD44-APC标记肿瘤干细胞用流式检测的时候群体会移动是怎么回事啊，同一个样品先后两次上样群体

如果一批细胞需要重复多次流式检测，最好使用多聚甲醛进行固定，这样才能排除细胞因离体后出现再分化的情况。与此同时，应该在再次检测的时候重新调整电压。

肿瘤细胞容易堵流式细胞仪，建议多洗几次机器，然后再上样，上样量一定不要超过10000个细胞每秒，并且用中速去收细胞，要不然很容易飘。

你可以试试PBS洗涤至少一次对于敏感的细胞最好含有1%的BSA（使细胞的环境更温和一点），+2mmol/EDTA可以防止细胞粘连。

如果排除了流式的问题，最大的可能性是样本不均一，考虑的是楼主制备单细胞悬液并未使细胞单个化，从而造成细胞群飘忽不定。此外，也需要考虑流式仪器的问题，可能是流式管道压力不够，流式管道堵塞导致传感器反应慢。建议一管上上去后acquire十来秒再record，当然最好是修流式