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做COIP实验,互作的两个蛋白在目标位置有条带,但是阴性对照(NC)在相同蛋白分子量的位置也出现了浅条带,是什么原因?怎么改善?

相关实验:免疫印迹与免疫检测实验

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迟C迟

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3 个回答

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小暮

有帮助

阴性不应该有条带,有条带就是有结合,这个说明抗体有非特异结合的可能:1.抗体特异性不够,如果反复多次阴性对照出现条带考虑,更换抗体。2.上样错误,仅表现一次阴性对照阳性,重复实验就行

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dxywode

有帮助

可能是抗体不好,可以换IgG抗体或者稀释样品。

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

说明两个蛋白可能本身就没有互作,出现的条带可能是本底,你减少曝光时间HA条带可能就看不到了

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