免疫荧光中DAPI 信号过强甚至看不清细胞核轮廓和核仁是什么情况？

1.组织切片太厚：这种情况下可以选择将组织切片变薄试试。
2.封闭不佳:封闭的目的就是为了减少非特异性的结合，减少背景染色。如果背景太强，可以考虑换种封闭液或者增加封闭孵育的时间。

结果出现这种现象很有可能是抗体比例太低，需提高抗体浓度，可配合提高二抗 浓度；共聚焦的激发荧光强度不够大；二抗孵育时是否是对应的种属

在细胞核用DAPI染过之后，在免疫荧光下出现类似于月亮的图像（月亮仔细看也有阴影），这是非常正常的，因为你的DAPI无法染核仁，所以空心的就是核仁！