免疫荧光中DAPI 信号过强甚至看不清细胞核轮廓和核仁是什么情况？
dxy_k5jymqe2
染细胞或组织 最后一步染DAPI 浓度在工作浓度范围内 时间十分钟 洗三遍 但是有时候会遇到一部分染的信号过强 明显是错误的 且也有细胞染的正常 请问是封片问题还是其他问题 如何处理？
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3 个回答
dxywode
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1.组织切片太厚：这种情况下可以选择将组织切片变薄试试。
2.封闭不佳:封闭的目的就是为了减少非特异性的结合，减少背景染色。如果背景太强，可以考虑换种封闭液或者增加封闭孵育的时间。
府宅
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结果出现这种现象很有可能是抗体比例太低，需提高抗体浓度，可配合提高二抗 浓度；共聚焦的激发荧光强度不够大；二抗孵育时是否是对应的种属
dxy_gwrp7ndq
有帮助
在细胞核用DAPI染过之后，在免疫荧光下出现类似于月亮的图像（月亮仔细看也有阴影），这是非常正常的，因为你的DAPI无法染核仁，所以空心的就是核仁！
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