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关于小鼠肾脏冰冻切片直接免疫荧光问题2

相关实验:免疫荧光技术

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丁香实验

关于小鼠肾脏冰冻切片直接免疫荧光:制作过的冰冻切片如何保存时间最长,是切片后未用4℃丙酮固定之前保存做的时候再用丙酮固定,还是用4℃丙酮固定后再保存,用的时候再滴加直接抗体?那么加过抗体荧光镜下观察过的冰冻切片又该如何保存,多长时间内荧光尚未淬灭完?

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9 个回答

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莹啊免疫啊

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冷丙酮固定10min.染色后-20保存,能放一个月,特别长时间的话,不然用石蜡?
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peaceful13

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一般是先保存~然后要染色的时候再加抗体染色,染完后的切片-20保存~一般一个月都还行
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sk1981521

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若长时间保存可丙酮固定后放在-20度保存,使用时再复温,按照正常步骤操作,封片时加抗淬灭剂封片,避光,4℃保存
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颜渊溪桥

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冰冻切片不用固定,加入包埋计直接丢-80,要快速处理,抗体要放稀释液里加。
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西柚味的芋圆

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能灌注固定最好,条件有限,取材后先固定几个小时后再包埋切片也可以,当然样本少可以马上切片的也可以切片后固定10分钟。血细胞对荧光结果有时候会有影响,比如FITC,但影响有多大还得看组织和荧光素。 2:组织比较多的话可以先放固定液里,取完材后一起拿过去 3:荧光淬灭的还是比较快的,最好当时就观察。现在也有抗淬灭的封片剂卖,有一定的效果,但也只是延缓一下。所以不用想长期保存结果了,最好当时看了后拍照留存。放4度避光保存。固定后的组织一般放两三个月是没有问题的
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CXCR3

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制作过的冰冻切片如果没有染色可以放在-80℃保存,用丙酮固定后保存。染色之后封片可以保存在4℃,维持一个干燥环境,建议一天之内拍摄,超过一天的片子荧光会逐渐减弱。。
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Timy最爱柠檬水

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应严格密封保存,用铝箔或者塑料薄膜密封好,防止失水,丙酮添加的顺序影响不大。
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txs900416

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固定后保存更长,加抗体后防止淬灭可放4度避光,一般一个月内都能看见
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dxy_0mxazdaw

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加过荧光抗体的样本也可以长时间保存的,可以加入抗淬灭剂封片,然后放到-20℃就可以长时间保存了
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