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科研学霸天团，48小时有问必答
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悬浮细胞
z流沙z
其实悬浮细胞不适宜做免疫荧光，建议诱导贴壁后再做
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问
NR8383肺泡巨噬细胞
z流沙z
状态还可以，继续培养，控制好密度和传代，建议离心
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生理盐水灌注的心脏
balalaLy
需要尽快固定的，生理盐水灌注后可以直接换多聚甲醛继续灌注然后再浸泡固定。
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问
请问Lyz2-cre会敲除掉中性粒细胞上的基因吗
z流沙z
一般是不会的，携带了细胞标志，是特异靶向的
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问
重组人肿瘤坏死因子-a
z流沙z
可以分别使用TNFa刺激人和鼠的细胞，进行对比。
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问
Euroscore2 sinoscore sts score
asswei
全组死亡率计算公式是：单位时间全组死亡个体数/单位时间全组平均种群数量×1000％。
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问
为什么用pma诱导分化的THP-1巨噬细胞不能吞噬HCT116，求助各位大佬
loveliufudan
THP-1巨噬细胞是一种人类单核细胞系，通常被用于研究巨噬细胞的生物学特性。PMA（Phorbol 12-myristate 13-acetate）是一种化合物，可以刺激THP-1细胞分化为成熟的巨噬细胞。虽然THP-1巨噬细胞经PMA诱导分化后表现出了许多巨噬细胞的典型特征，如吞噬能力和炎症反应等，但并不是所有类型的细胞和微生物都能被它们吞噬。HCT116是一种人类结肠癌细胞系，与THP-1细胞
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脂多糖连用D-氨基半乳糖造模
毛利小五郎的徒弟
造模时混好的溶液最后需要做ph滴定。
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方差分解
z流沙z
一般就是看均值和方差，方差图参考点与点之间的距离
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问
请问园子里有人做小鼠的毛乳头细胞实验么
是TTT
我有β-catenin可以提供
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问
外周血提白细胞
loveliufudan
在从外周血中提取白细胞时，可以考虑以下几点：分离白细胞时，应尽可能避免带入红细胞，因为红细胞的存在可能会干扰后续实验的结果。可以采用梯度离心等方法，分离白细胞和红细胞。在裂解白细胞时，应使用足够的裂解液，使细胞能够充分裂解释放出目的蛋白。可以考虑使用含有蛋白酶抑制剂的裂解液，以避免蛋白酶降解目的蛋白。如果白细胞量较少，可以考虑进行富集，例如使用免疫磁珠富集目的蛋白，或者采用增加样品量的方式。在We
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外泌体电镜负染结果显示这样，是什么？
takuya0528
可以参考下JEV一篇关于外泌体不同形态的文章，PMID：28717422
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问
人脐静脉内皮细胞细胞培养问题
loveliufudan
很明显出现了细胞污染，可以考虑以下几个步骤来处理：立即停止污染的培养，将培养皿或培养瓶标记为“污染”。在进行任何处理之前，首先应该确定污染的类型，可能的来源和污染的程度。常见的细胞污染类型包括细菌、真菌、酵母、病毒等。在更换培养基、加入抗生素等处理之前，需要将培养皿或培养瓶里的细胞全部清除。可以使用一些消毒剂，如70%的乙醇、2%的次氯酸钠溶液等，对培养皿进行消毒。消毒剂使用前，应该先试验不同浓度
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问
葡萄糖诱导细胞衰老一般诱导几天
huarenqiang5
葡萄糖诱导细胞衰老一般需要5－7天。
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请问为什么酶联免疫测定细胞无血清饥饿后细胞培养上清的酪蛋白浓度时，变化忽高忽低
loveliufudan
在酶联免疫吸附实验中，饥饿处理可以影响细胞代谢和生长，从而可能影响到上清中特定蛋白的浓度，其中包括酪蛋白。因此，酶联免疫测定细胞无血清饥饿后上清中酪蛋白浓度的变化是可以理解的。饥饿处理可能导致细胞代谢的变化，如能量代谢的降低、蛋白质降解的增加等，这些变化可能影响到酪蛋白的分泌和稳定性。此外，细胞在饥饿条件下可能会分泌不同的细胞因子，这些细胞因子可能对酪蛋白的分泌和稳定性产生影响，从而导致酪蛋白浓度
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问
免疫组化Image J分析
asswei
平均荧光强度(Mean) = 该区域荧光强度总和(IntDen) / 该区域面积。测量参数设置错误所致。
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电位差驱动力的形成原因及影响因素是什么？
asswei
静息电位不是任何一种离子的平衡电位，而是所有离子电流的净电流之和为零的平衡电位。静息电位的影响因素有很多，但主要是两个：一是各种离子在细胞内外的浓度梯度，二是各种离子的相对膜电导（膜通透性）。
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小鼠原始cd4细胞体外分化th17
asswei
人和小鼠TGF-β1的同源性高达99%，表明在不同种属中TGF-β都具有重要的生物学功能。所以两者均可以用。
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多克隆抗体制备，免疫兔子
loveliufudan
通常情况下，不建议直接将含有高浓度尿素的蛋白用于动物免疫免疫，因为高浓度尿素会对动物产生毒性影响，可能会导致免疫反应异常或不良反应。同时，尿素也可能与蛋白质结合，影响蛋白的二级、三级结构和免疫原性。为了克服这些问题，可以采用以下两种方法：尝试将蛋白在含有较低浓度尿素的缓冲液中进行重折叠和重组，以使其回复到天然构象并增强免疫原性。在纯化过程中，可以逐渐降低尿素浓度，并将其转移到合适的缓冲液中，最终得
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竞争法胶体金，不消线
毛利小五郎的徒弟
不消线可能是因为过量的蛋白可能会封闭某些结合位点，建议换用其他的封闭方式，作对比试验
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