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科研学霸天团,48小时有问必答
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脊髓冰冻切片
balalaLy
我自己做过灌注和不灌注的,觉得区别不大。包埋后速冻到液氮我也试过,会裂开。我一般是在切片机里边等它冻住了再放-80
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针头过滤器求助
bamboopiggy
那种老式的滤器,需要自己组装的,但是现在大家基本都用一次性的了,自己组装的,弄不好会漏,还要自己高压灭菌比较麻烦,你可以问问一些中国的小的耗材公司可能会有。
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直接测小鼠结肠组织的treg和th17
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膜蛋白按照说明书1:50一抗浓度,整个细胞(悬浮细胞)都染色。调整1:500后还是整个细胞都有染色图2,请问为啥说明书只有膜上有
bamboopiggy
1.继续调整浓度,2,用促贴壁试剂让细胞贴壁,然后再染
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问
miRNA靶位点预测,如何精准定位?
秋秋欣欣
看看psRobot能不能预测,这个一个植物靶基因预测工具
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问
关于Naive CD4+T的活化增殖
天一湖医者
CD3不超过50ng/ml,CD28不超过30ng/ml。
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拥挤棒状杆菌感染抗生素如何选择?
dxy_gwrp7ndq
应根据药敏实验选择相应抗生素控制感染
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胶体金释放不完全问题
天一湖医者
可能是因为你的胶体金的颗粒大小的选择和最佳抗体标记量的选择上出了问题,这是多方面的因素导致的,你得先固定一个影响因子来调另一个因子,这样反复实验看看效果。
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如何提高circRNA的成环效率
天一湖医者
由于circRNA本身就能环化,所以将circRNA两侧的内含子序列充当环化臂进行构建;另外,也可以取一侧内含子序列1kb,另一 侧构建互补序列充当环化臂,最后检测circRNA的过表达效率,取最佳构建方式。
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问
请问各位大佬知道为什么我的PMB单独加到培养液里RAW细胞没有反应,但是跟我的一个蛋白混合后加就会引起细胞的炎性反应吗?
天一湖医者
有可能是血清浓度问题,或者是培养液有问题。,
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纳米材料加入真菌培养基后易被析出。
天一湖医者
纳米抗菌材料与真菌接触后会诱导其细胞产生氧化应激反应,从而使真菌的细胞结构和脂质、蛋白质和DNA等成分被氧化破坏。有些情况下纳米抗菌材料也会使真菌细胞内部产生超氧阴离子自由基、羟基自由基、过氧化氢和单线态分子氧等活性氧物种,这些物质的过度累积会造成细胞的凋亡。
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真菌培养过程中所用培养基调整ph值后不易凝固
生如夏花zzh
酸度过高也可能导致培养基溶解。再试试看
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培养真菌所用PDA培养基调整ph值后很难凝固,求助
天一湖医者
降低pH值造成培养基酸解,因此不易凝固
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问
自带发光基团的抗体都会串光吗?实验室买的PH3就会串光,只能避开串光的波长来做实验
balalaLy
串光的话可以根据共染的几个荧光光谱适当缩小一下
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问
冷冻切片一般厚度是多少,多大厚度不影响染荧光抗体呢
balalaLy
看你的是什么组织。切片的厚度一般都是越薄越好,像脑组织可以切到6um左右就挺不错了。但是有些组织太薄了一方面不容易切,另一方面可能观察不到某些结果
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问
T细胞杀伤实验为什么需要用激活5-7天的细胞?
迟C迟
是不是你的CART细胞活力不好,最好根据文献描述的实验细节,不然审稿人会问的。
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问
wb目的蛋白分子量跨度很大?
bamboopiggy
用10%-12.5%的胶,以小分子量的那个marker没有跑出去为止,转膜300mmA,2个小时足够
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问
自己制胶跑出来经常歪歪扭扭,怎样才能把胶跑的非常漂亮?
bamboopiggy
不能急,一定要把胶混匀,且彻底凝固后,再用
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问
为什么提高大分子量蛋白的转移的时候,小分子量蛋白会丢失一些哪?什么原因?
bamboopiggy
小分子量的蛋白跑的比大分子量的快,如果为了得到更多得大分子量蛋白,会是小分子量得蛋白穿过膜,丢失了
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问
WB实验目的蛋白空白,但是marker很明显,为什么?
bamboopiggy
marker明显至少转膜是转过去的了,会不会是条带位置不对?
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