实验问答4,386,826 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问吸附抗体的选择，非稀释，稀释？

dxywode

选择抗体应先了解其反应谱和适用条件（包括适用切片、稀释度及温育时间等）。使用一种新抗体时，必须首先摸索出最佳浓度，所谓最佳浓度就是能获得最佳特异反应所需抗原的最低浓度。或者按照有关说明书的提示。二、稀释1.一般用0.01MPBS，PH值7.2；2.或用0.05MTBS，PH值7.6；

5 回答145 围观

问为什么细胞培养需要用到血清？

bqejjh123

加入动物血清是为了给体外培养的细胞提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶,可以促进细胞的发育。

4 回答386 围观

问做wb实验每次只加一种一抗，可以同时加两种或者多种一抗的吗？

bqejjh123

最好不要，根据抗体而定，只是基础成分一般都是TBST或PBST。抗体说明书会写到底加BSA还是NF-MILK。有钱还可以买专用稀释液，特异性进一步降低，成分可能包括人工合成的肽、明胶、酪蛋白、多糖类等。

3 回答1180 围观

问免疫组化染色检查是比较前沿的一种检查方法，可以用来判断肿瘤的早中晚期嘛？

Lyy娟娟lxj

肺癌的免疫组化染色检查是一种确诊肺癌类型的检查方法。肺癌的免疫组化分析可以帮助判断肺癌患者的具体病理类型。对于缺少组织形态学特征的肿瘤，主要依靠其免疫组化，作为重要的诊断依据，判断免疫组化染色为弥漫强阳性的标准为。

5 回答188 围观

问请问现在T细胞常见的抗体有哪些？

府宅

T 细胞（全部）CD3细胞膜细胞膜受体杀伤性 T 细胞CD8细胞膜细胞膜受体杀伤性 T 细胞IFNγ, TNF分泌细胞因子杀伤性 T 细胞EOMES

3 回答162 围观

问目前有耗尽型T细胞的抗体吗？

dxy_gwrp7ndq

免疫T细胞彻底耗竭与DNA甲基化过程有关

3 回答104 围观

问关于免疫荧光细胞效率的问题

府宅

内源性原因就是你的细胞长的太密了。外源性可能是你转染造成的。还有可能更你做一抗二抗有关。

3 回答81 围观

问关于chip-seq或者cut-tag的问题

府宅

ChIP-seq可以不设置生物学重复；如果设置生物学重复，要尽可能增加重复个数。

3 回答142 围观

问免疫共沉淀检测到蛋白信号弱的原因是什么呢？

府宅

抗体浓度太低，应对措施：调整抗体浓度，必要时设立浓度梯度，摸索最佳浓度；

2 回答142 围观

问免疫组织化染色试剂配制和操作步骤？

dxywode

1. 标本预备①白腊包埋组织切片：由病理室通例处理②冰冻组织切片：由病理室通例处理③细胞爬片：将无菌盖玻片置于六孔板中,接种细胞,待细胞发展达到60％以上后掏出玻片,4%多聚甲醛固定2 h.2. 试剂预备①抗体选择单克隆抗体针对单一表位,具有较高的特异性,但在该表位损坏后将得不到阳性成果;多克隆抗体表位针对多个表位,可防止单克隆抗体的缺陷,但是可能消失非特异性杂交.是以,不管选择单克隆照样多克隆抗

4 回答72 围观

问最近跟着老师做实验，想咨询一下，做双向免疫扩散时用的合成抗原OVA~undefined的浓度是多少合适？如何控制才能得到最优结果？

dxywode

1）血清学诊断 2）免疫化学分析：沉淀线位置主要与抗原、抗体两者浓度比例有关，沉淀线靠近抗原空，提示抗体含量高；靠近抗体空，提示抗原含量多。分子量大扩散慢，扩散圈小，形成的沉淀线弯向分子量大的一边。如二者分子量相对，则形成直线。 3）抗体效价滴定：固定抗原浓度，稀释抗体；或抗原抗体双方做不同稀释医学|教育网，经自由扩散，一出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。 4）分析抗原性质 5）鉴定抗原或

3 回答81 围观

问表面效应如何降到最低

府宅

可以颗粒直径的变小而降低表面效应

3 回答57 围观

问荧光免疫组化背景为什么模糊？

府宅

估计很有可能是样本制作不符合显微镜要求。

3 回答189 围观

问1. Western blot结果中的背景为什么较高? 2. Western blot结果中无信号或显示信号弱

府宅

1. 抗体浓度过高，洗涤不充分。2. 封闭不充分。3. 使用了不恰当的封闭剂，可尝试不同的封闭剂。4. 曝光过度。5. 操作过程中膜干了。6.发光液质量问题。

3 回答107 围观

问血清与血浆该如何选择如何制备高质量样本

dxy_gwrp7ndq

可以低温：4℃；低速：人血~2000rpm、小鼠~1000rpm、大鼠~2500rpm

4 回答522 围观

问有关流式细胞术的问题

府宅

调节补偿可以选择的荧光素偶联抗体比较多，达到我们目的的补偿设置是比较容易的

3 回答102 围观

问对流免疫电泳实验不出现沉淀线的原因?

陈文豪平邑

抗原抗体在一定的pH溶液中带有电荷，在电场的作用下可发生定向移动。将抗原抗体加入pH8.6的琼脂凝.将抗体置于正极，电泳后则在两孔之间相遇，并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。

3 回答162 围观

问我想知道制备好的抗体是不是放在4℃就可以长期使用，不用放到－20℃?反复冻融影响抗体品质吗？怎样提前预支抗体不能用了?

dxywode

1. 收到抗体后请务必在12000rpm 离心1-5min 后再打开管盖进行分装和保存！质优的抗体使用非常特殊的储存管，只有在12000rpm 离心1-5min 才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来。即使是在10000rpm 离心也会导致离心不完全，导致出现抗体的量不足的现象！2. 对于大部分抗体，比较合适的保存方式是分装后保存在 -20 度 or -80 度对绝大多数抗体来说，保存在-20

3 回答88 围观

问一般什么样的图片能够展现病理程度

dxywode

只有诊断正确，才能对症下药。正确的诊断，来自宿主、病原(因)和环境条件三方面综合分析。

3 回答104 围观

问免疫组织化学染色过程中，血清封闭能够去除的是一抗还是二抗的非特异性染色？封闭后还是有非特异性染色是不是就只能换一抗了？

dxy_gwrp7ndq

书中“组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称为非特异性背景染色，最常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶元和结缔组织成分上。最有效方法是在用第一抗体前加制备第二抗体动物之非免疫血清(1:5~1:20) 封闭组织上带电荷基团而除去与第一抗体非特异性结合。必要时可加入 2%~5% 牛血清蛋白，可进一步减少非特异性染色。作用时间为 10~20min。也可用除制备第一抗体以外的其它动物血清 (非免疫的)。有明

3 回答109 围观

1
•••
73
74
75
76
77
•••
80
跳至页

提问

48 小时有问必答

扫一扫

添加小程序

关注公众号

反馈

TOP

打开小程序