脊髓冰冻切片

相关实验：组织切片的免疫过氧化物酶标记实验

dxy_x5kdhq3w

2022-06-23

大鼠脊髓冰冻切片，有几个疑问

看到很多要用心脏灌注，但是我心脏灌注效果一直不行，我想直接活体取材，放在4摄氏度，4%多聚甲醛24h；15，20，30%蔗糖梯度脱水；OCT包埋；-80保存。这样包埋可以吗？
心脏灌注后和新鲜取材后用4%多聚甲醛固定，有区别吗？
OCT包埋后，需要液氮速冻然后-80保存吗？组织会裂开吗？
蔗糖沉底必须完全沉底嘛？能不能沉到中间呢？
之前灌注后的脊髓组织，15%沉底后，30%一直沉不了底，五天了，会是什么原因呢，

3 个回答

balalaLy

2022-06-25

有帮助

我自己做过灌注和不灌注的，觉得区别不大。

包埋后速冻到液氮我也试过，会裂开。我一般是在切片机里边等它冻住了再放-80

天一湖医者

2022-06-24

有帮助

解冻后用OCT胶包埋组织(包埋时确保需要切片的那一面朝上)放入冰冻包埋机中，20min左右即可切片。用OCT胶包埋组织时要均匀，不要留有气泡;包埋时去额叶半脑按照"冠状切面额极朝上放至并包埋”，一侧的小脑脑干按照“时装切面，中线面朝上放至、包埋心肺肝肾等组织按照“水平切面，横截面较小侧向前放置、包埋”;　“沉糖”的时间不宜过长

bamboopiggy

2022-06-23

有帮助

1.心脏灌注是为了更好的把血细胞清除出去，否则会影响组化结果。2，不建议直接包埋，还是多练练吧。3，OCT包埋后，如果有条件就放液氮里，没条件，直接放-80也可以。4.蔗糖沉底的目的是为了脱水，如果沉不下去，就多沉几天吧。