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脊髓冰冻切片

相关实验:组织切片的免疫过氧化物酶标记实验

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dxy_x5kdhq3w

大鼠脊髓冰冻切片,有几个疑问

  1. 看到很多要用心脏灌注,但是我心脏灌注效果一直不行,我想直接活体取材,放在4摄氏度,4%多聚甲醛24h;15,20,30%蔗糖梯度脱水;OCT包埋;-80保存。这样包埋可以吗?
  2. 心脏灌注后和新鲜取材后用4%多聚甲醛固定,有区别吗?
  3. OCT包埋后,需要液氮速冻然后-80保存吗?组织会裂开吗?
  4. 蔗糖沉底必须完全沉底嘛?能不能沉到中间呢?
  5. 之前灌注后的脊髓组织,15%沉底后,30%一直沉不了底,五天了,会是什么原因呢,
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3 个回答

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balalaLy

有帮助

我自己做过灌注和不灌注的,觉得区别不大。

包埋后速冻到液氮我也试过,会裂开。我一般是在切片机里边等它冻住了再放-80

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天一湖医者

有帮助

解冻后用OCT胶包埋组织(包埋时确保需要切片的那一面朝上)放入冰冻包埋机中,20min左右即可切片。用OCT胶包埋组织时要均匀,不要留有气泡;包埋时去额叶半脑按照"冠状切面额极朝上放至并包埋”,一侧的小脑脑干按照“时装切面,中线面朝上放至、包埋心肺肝肾等组织按照“水平切面,横截面较小侧向前放置、包埋”; “沉糖”的时间不宜过长

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bamboopiggy

有帮助

1.心脏灌注是为了更好的把血细胞清除出去,否则会影响组化结果。2,不建议直接包埋,还是多练练吧。3,OCT包埋后,如果有条件就放液氮里,没条件,直接放-80也可以。4.蔗糖沉底的目的是为了脱水,如果沉不下去,就多沉几天吧。

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