48小时，有问必答
丁香实验，轻松科研
已收录 10000+ 实验
48小时，有问必答
丁香实验，轻松科研
已收录 10000+ 实验
48小时，有问必答
登录
提问
提问
我要登录
｜免费注册
丁香通
首页
|
实验问答
|
免疫
实验问答
4,424,237 科研人在看
科研学霸天团，48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
外周血提白细胞
loveliufudan
在从外周血中提取白细胞时，可以考虑以下几点：分离白细胞时，应尽可能避免带入红细胞，因为红细胞的存在可能会干扰后续实验的结果。可以采用梯度离心等方法，分离白细胞和红细胞。在裂解白细胞时，应使用足够的裂解液，使细胞能够充分裂解释放出目的蛋白。可以考虑使用含有蛋白酶抑制剂的裂解液，以避免蛋白酶降解目的蛋白。如果白细胞量较少，可以考虑进行富集，例如使用免疫磁珠富集目的蛋白，或者采用增加样品量的方式。在We
3 回答
129 围观
3 回答
129 围观
去回答
问
外泌体电镜负染结果显示这样，是什么？
takuya0528
可以参考下JEV一篇关于外泌体不同形态的文章，PMID：28717422
3 回答
90 围观
3 回答
90 围观
去回答
问
人脐静脉内皮细胞细胞培养问题
loveliufudan
很明显出现了细胞污染，可以考虑以下几个步骤来处理：立即停止污染的培养，将培养皿或培养瓶标记为“污染”。在进行任何处理之前，首先应该确定污染的类型，可能的来源和污染的程度。常见的细胞污染类型包括细菌、真菌、酵母、病毒等。在更换培养基、加入抗生素等处理之前，需要将培养皿或培养瓶里的细胞全部清除。可以使用一些消毒剂，如70%的乙醇、2%的次氯酸钠溶液等，对培养皿进行消毒。消毒剂使用前，应该先试验不同浓度
3 回答
63 围观
3 回答
63 围观
去回答
问
葡萄糖诱导细胞衰老一般诱导几天
huarenqiang5
葡萄糖诱导细胞衰老一般需要5－7天。
3 回答
64 围观
3 回答
64 围观
去回答
问
请问为什么酶联免疫测定细胞无血清饥饿后细胞培养上清的酪蛋白浓度时，变化忽高忽低
loveliufudan
在酶联免疫吸附实验中，饥饿处理可以影响细胞代谢和生长，从而可能影响到上清中特定蛋白的浓度，其中包括酪蛋白。因此，酶联免疫测定细胞无血清饥饿后上清中酪蛋白浓度的变化是可以理解的。饥饿处理可能导致细胞代谢的变化，如能量代谢的降低、蛋白质降解的增加等，这些变化可能影响到酪蛋白的分泌和稳定性。此外，细胞在饥饿条件下可能会分泌不同的细胞因子，这些细胞因子可能对酪蛋白的分泌和稳定性产生影响，从而导致酪蛋白浓度
2 回答
58 围观
2 回答
58 围观
去回答
问
免疫组化Image J分析
asswei
平均荧光强度(Mean) = 该区域荧光强度总和(IntDen) / 该区域面积。测量参数设置错误所致。
3 回答
76 围观
3 回答
76 围观
去回答
问
电位差驱动力的形成原因及影响因素是什么？
asswei
静息电位不是任何一种离子的平衡电位，而是所有离子电流的净电流之和为零的平衡电位。静息电位的影响因素有很多，但主要是两个：一是各种离子在细胞内外的浓度梯度，二是各种离子的相对膜电导（膜通透性）。
3 回答
52 围观
3 回答
52 围观
去回答
问
小鼠原始cd4细胞体外分化th17
asswei
人和小鼠TGF-β1的同源性高达99%，表明在不同种属中TGF-β都具有重要的生物学功能。所以两者均可以用。
3 回答
79 围观
3 回答
79 围观
去回答
问
多克隆抗体制备，免疫兔子
loveliufudan
通常情况下，不建议直接将含有高浓度尿素的蛋白用于动物免疫免疫，因为高浓度尿素会对动物产生毒性影响，可能会导致免疫反应异常或不良反应。同时，尿素也可能与蛋白质结合，影响蛋白的二级、三级结构和免疫原性。为了克服这些问题，可以采用以下两种方法：尝试将蛋白在含有较低浓度尿素的缓冲液中进行重折叠和重组，以使其回复到天然构象并增强免疫原性。在纯化过程中，可以逐渐降低尿素浓度，并将其转移到合适的缓冲液中，最终得
2 回答
107 围观
2 回答
107 围观
去回答
问
竞争法胶体金，不消线
毛利小五郎的徒弟
不消线可能是因为过量的蛋白可能会封闭某些结合位点，建议换用其他的封闭方式，作对比试验
2 回答
70 围观
2 回答
70 围观
去回答
问
【请教】双抗夹心层析，阴性阳性区分不开
毛利小五郎的徒弟
考虑是包被的问题，夹心包被的程度不够所以分不开
2 回答
65 围观
2 回答
65 围观
去回答
问
胶体金产品出现断点是什么情况
loveliufudan
断点是胶体金产品中常见的问题，可能是由多种因素引起的。以下是一些可能导致断点的因素：pH值：胶体金的稳定性受pH值影响较大，如果pH值偏高或偏低可能会导致断点。请确保使用的缓冲液的pH值适合胶体金产品的稳定性。盐浓度：高盐浓度会影响胶体金的稳定性，导致断点。请确保使用的缓冲液的盐浓度适合胶体金产品的稳定性。温度：胶体金对温度敏感，高温可能导致胶体金的稳定性下降，导致断点。请确保使用的试剂在适当的温
2 回答
104 围观
2 回答
104 围观
去回答
问
miRNA靶向mRNA的3’-UTR，可以用FISH来证明两者的靶向关系吗？
毛利小五郎的徒弟
可以做FISH来验证靶向关系，先验证关系再验证通路。
3 回答
64 围观
3 回答
64 围观
去回答
问
胶原蛋白提取盐析蛋白越来越少
毛利小五郎的徒弟
复溶时间延长一些，然后可以多次复溶离心。
2 回答
83 围观
2 回答
83 围观
去回答
问
我想用DNMT1抑制剂DAC处理细胞观察细胞甲基化变化以及下游基因表达变化，大概用什么浓度合适？
毛利小五郎的徒弟
一般0.1-0.5mmol/l的浓度处理就够了
3 回答
66 围观
3 回答
66 围观
去回答
问
请问EdU和Ki67做免疫荧光染色，怎么同时染
asswei
EDU是一种新型的非放射性同位素细胞增殖检测的方法，在细胞培养、实体组织及临床研究中得到了广泛的应用。该技术可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等，EdU亦适用于活体注射。与传统的免疫荧光染色检测方法相比，EdU检测法更简单、更快速、更准确，不需要严苛的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增
2 回答
91 围观
2 回答
91 围观
去回答
问
免疫组化图片明明肉眼可见是增强的，但是Image J分析mean值却反而下降，这是为什么呀
毛利小五郎的徒弟
有可能是image的灰度值没有设置正确，image的参数设置错误就会出现相反的结果
2 回答
74 围观
2 回答
74 围观
去回答
问
请问哪位大神有肠道HE染色的protocol？🙏
loveliufudan
以下是一般肠道HE染色的protocol，供参考：材料：1.肠道组织切片2.1%硫酸铁溶液3.0.5%氯化钡溶液4.酒精：70%、90%、95%和100%5.苏木精染色液6.伊红染色液7.脱水剂：丙酮和xylene8.封片剂步骤：1.将切片放入1%硫酸铁溶液中，浸泡5分钟，去除多余的溶液。2.将切片放入0.5%氯化钡溶液中，浸泡2-3分钟，去除多余的溶液。3.将切片置于70%乙醇中，浸泡5分钟，然
3 回答
70 围观
3 回答
70 围观
去回答
问
aSMA抗体为什么染进核了？求助求助！
loveliufudan
如果您的aSMA染色显示出了细胞核的颜色，可能会有以下几种可能性：实验操作失误。例如，未完全去除细胞外的aSMA抗体，或者使用了与aSMA抗体交叉反应的抗体。染色效果异常。可能是染色试剂批次变异，或者是染色温度、时间等实验条件不恰当。样本细胞异质性。不同的细胞类型在染色效果上可能会存在差异，可能会导致aSMA染色在细胞核中出现颜色。
2 回答
48 围观
2 回答
48 围观
去回答
问
想用受体拮抗剂处理细胞，如何证明受体拮抗剂使受体是去了活性?
loveliufudan
为了证明受体拮抗剂使受体失去活性，您可以使用以下方法：放射性配体结合实验（Radioligand binding assay）：该方法可用于测量细胞膜受体的结合活性，利用放射性标记的配体与受体结合，通过测量剩余的未结合的配体来确定受体活性是否被抑制。使用受体拮抗剂处理细胞，如果受体失去活性，则绑定配体的数量会减少。細胞酶連結免疫吸附分析（Cell-based ELISA）：该方法利用受体特异性抗体
2 回答
75 围观
2 回答
75 围观
去回答
1
•••
8
9
10
11
12
•••
81
跳至
页
提问
48 小时有问必答
扫一扫
添加小程序
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序
