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移植瘤组织石蜡包埋的详细过程是什么样的呢

相关实验:石蜡切片免疫组化实验

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医学生之声

移植瘤组织石蜡包埋的详细过程是什么样的呢

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7 个回答

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skyye

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取下移植瘤组织标本后放入福尔马林或多聚甲醛中固定24-48h,然后进行脱水,脱水后再进行石蜡包埋,包埋时需注意组织的方向。包埋时需提前打开包埋机预热并溶解蜡块,组织放入热的蜡液中浸蜡几分钟,然后将组织块放入包埋盒中,滴加蜡液后放在冷台上凝固,注意避免产生气泡

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周末也要努力呀

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1. 组织固定:将移植瘤组织取出后,立即放入10%中性缓冲福尔马林溶液中进行固定。固定时间通常为24-48小时,固定时间过长可能会导致组织质量下降。

2. 脱水:将固定的组织从福尔马林中取出,用流动水冲洗后,将组织逐渐置于浓度递增的酒精溶液中进行脱水。常用的酒精浓度为70%、80%、90%和100%。每个浓度的酒精浸泡时间通常为1-2小时。

3. 渗透:将脱水后的组织逐渐置于浸渍剂(如甲醇和二甲苯)中进行渗透。渗透时间通常为2-3小时。

4. 浸渍:将渗透后的组织置于熔化的石蜡中进行浸渍。石蜡温度通常为55-60摄氏度。浸渍时间通常为2-3小时。

5. 包埋:将浸渍后的组织放置于石蜡包埋模具中,调整组织的位置和方向,然后倒入熔化的石蜡,使组织完全浸没在石蜡中。待石蜡凝固后,将包埋好的组织块取出。

6. 切片:将包埋好的组织块放入切片机中,用刀片将组织切成薄片。切片厚度通常为4-6微米。

7. 制片:将切好的组织片放置在玻片上,用热水或热板加热使组织片与玻片紧密结合。

8. 染色:根据需要,对组织片进行染色处理,如常规的血液学染色、免疫组化染色等。

9. 盖片:将染好色的组织片盖上盖玻片,使用合适的封片剂将盖玻片封住。

10. 标签:在玻片上标注组织信息,如病人编号、组织类型等。



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秋秋欣欣

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(1)打开包埋机制冷台。


(2)将包埋机蜡缸注满干净的石蜡。


(3)打开脱水机,拿出组织框并放人包埋机的待包区。


(4)仔细看清号码,按顺序从最前面的号码开始包。


(5)将包埋模放于包埋机出蜡口。


(6)用镊子将包埋盒从脱水篮中拿出。


(7)用手将包埋盒盖子打开。


(8)更换镊子,可将此镊子在金属热台上轻轻敲打一下,以防有微小组织粘在镊子上。


(9)注入少量蜡,将组织放入包埋模,压平(仔细观察包埋面,如有线结钢针必须去除)。


(10)将包埋盒放于包埋模上,注蜡,不能有气泡。


(11)将包好的包埋模放于冷台上。


(12)重复(5)~(11)步,直至全部包完。


(13)包埋完成后必须清点蜡块数并登记、签名。


(14)关闭冷台。


(15)将包埋机下的废蜡盒拿出,铲去废蜡。


(16)将包埋机擦干净,在使用机器登记本上签名。

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高山云初

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1.取材固定:离体的组织不及时固定,组织就会自溶,抗原就会扩散。固定就是加入一些可以让蛋白质变性的物质(比如说甲醛),使得蛋白质的结构被固定住,不再发生变化,同时也不会再发生一些活性反应,这样才好做后续的染色步骤。常见固定液是 4%的多聚甲醛和饱和苦味酸。根据不同目的、组织特征代表性取材。取的材料应该小而薄。便于固定剂迅速渗入内部,一般厚度不超过 2mm,大小不超过 5x5mm²。每个组织最好多切几块新鲜组织古定(组织块不宜太大太厚,这样固定液很难进入里面,可能会导致在较短的时间内脱水不完全,引起一系列的问题,比如浸蜡不彻底,切片不好完成,切不完整。导致后来切片染色的脱落,造成染色的失败,组织块也不能大小,否则不能保证切片数量,且透明时间和浸蜡时间不能很好的把握着固定时间因固定剂种类而是大多 6-12 小时,一般不超过 12 小时。视组织固定的难易程度而定。后续如果做免疫组化,不应超过 12 小时;后续如果做 HE 染色,不应超过 24 小时。固定完之后用水洗(目的:洗去渗入组织的固定液,终止固定以免影响对组织的内结构的观察,分析。换液两次,一次半小时。)之后可直接脱水包埋或放入 75%的乙醇4度可长期保存

2.脱水:从75%的乙醇中取出,分别放到80%,90%,100%(Ⅰ)的乙醇中半小时,再放入100%乙醇中15min。固定完直接水洗包埋的,应从 70%乙醇开始,易碎组织从 50%乙醇开始。组织脱水时间不应过长,尤其是高浓度乙醇,要特别注意控制时间

3.透明:透明的目的是置换组织内的脱水剂,为下一步浸蜡起到桥梁作用,二甲苯可以去除脂肪,乙醇+二甲米(1:1)2h:二甲苯(Ⅰ),二甲苯(Ⅱ)各10min(根据组织的大小和透明的难易程度不同,透明的时间回以根据具体情况调整,颜色浅的组织表面油亮,可以透过光时效果较好,颜色较深的组织至少边缘可以透光。类似于风干的杏肉。)

4.浸蜡:浸蜡目的是置换组织中的透明剂,为包埋作准备。二甲苯+石蜡(1:1)2h;石蜡(Ⅰ)1h;石蜡(Ⅱ)2h。(浸蜡的时间也可以长一些)

5.包埋:在冰盒上进行,将融好的纯蜡(最好提前4小时以上开始融蜡,新蜡更难融)倒入蜡盒(可以浸没组织就行,大约蜡盒的三分之一)由于蜡盒底部与冰盒接触,底部的蜡会先凝固,这样就可以把组织用镊子夹住立在底部。然后继续将蜡盒倒满,便干切片机夹住蜡块。待蜡块完全凝固,包埋完成。

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毛利小五郎的徒弟

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1.固定取新鲜组织浸泡在4%多聚甲醛或10%福尔马林溶液中固定24-48h。固定完后自来水冲洗五次,各30min。

2.组织经过50%、70%、85%、95%的梯度酒精各30min,无水乙醇两次,每次30min完成脱水。

3.分别经过无水乙醇:二甲苯、二甲苯(Ⅰ)(根据组织透明度,可减少或增加第二遍二甲苯透明的时间)、二甲苯(Ⅱ)各30min


4、浸蜡蜡Ⅰ,蜡Ⅱ各30min.


5、包埋将金属托放入熔化的石蜡,再放入组织,冷固待石蜡凝固。

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粥辰辰辰辰

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石蜡包埋是病理日常工作中最常用的包埋方法。用于包埋的石蜡熔点一般在60℃左右。有些情况下,如某些酶染色时,则需采用低温石蜡包埋,此时需用熔点为 52~56℃的石蜡进行包埋,以保存组织内酶的活性包埋时首先注意有无特殊的包埋面(如分层组织、皮肤和内镜活检样本等),不清楚时及时与取材医师联系。先将熔化的石蜡倾入包埋模具中,再用加热的弯曲钝头镊子轻轻夹取包埋盒中已经浸蜡的组织块,使组织块的最大面或被特别指定处的组织面向下埋入熔蜡中。应将组织块平整地置放于包埋模具底面的中央处,包埋面必须平整,包埋温度不应过高,否则易造成组织块的烫伤,影响诊断。对于胃镜样本,需同时多块组织包在一起,按黏膜面(如需要可事先做标记,一般如带有黏膜肌时,因黏膜肌的收缩,组织往往呈马蹄形,则凸面为黏膜面。如组织块为片状,竖起来包埋即可)与蜡块垂直方向放入包埋模具底面的中央处,包埋于同一蜡块内的多块细小组织应彼此靠近并位于同一平面上平铺包埋,注意不要混入杂物。腔壁、皮肤和黏膜组织必须垂直包埋(立埋)。二、将标记有病理号的包埋盒置于包埋模具上(病理号朝上)并二次注蜡加满。


三、将模具直接移至冷台上或待包埋模具内,待熔蜡表面凝固后,将模具移置于冰水以加速凝固。


四、从包埋模具中取出凝固的包埋蜡块(简称蜡块),用刀片或修蜡仪去除蜡块周围的过多石蜡。


五、使用包埋机包埋则按照相关包埋机厂商的说明书操作

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小小小小小芳

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石蜡包埋全过程:1.取材固定:离体的组织不及时固定,组织就会自溶,抗原就会扩散。固定就是加入一些可以让蛋白质变性的物质(比如说甲醛),使得蛋白质的结构被固定住,不再发生变化,同时也不会再发生一些活性反应,这样才好做后续的染色步骤。常见固定液是 4%的多聚甲醛和饱和苦味酸。根据不同目的、组织特征代表性取材。取的材料应该小而薄。便于固定剂迅速渗入内部,一般厚度不超过 2mm,大小不超过 5x5mm²。每个组织最好多切几块新鲜组织古定(组织块不宜太大太厚,这样固定液很难进入里面,可能会导致在较短的时间内脱水不完全,引起一系列的问题,比如浸蜡不彻底,切片不好完成,切不完整。导致后来切片染色的脱落,造成染色的失败,组织块也不能大小,否则不能保证切片数量,且透明时间和浸蜡时间不能很好的把握着固定时间因固定剂种类而是大多 6-12 小时,一般不超过 12 小时。视组织固定的难易程度而定。后续如果做免疫组化,不应超过 12 小时;后续如果做 HE 染色,不应超过 24 小时。固定完之后用水洗(目的:洗去渗入组织的固定液,终止固定以免影响对组织的内结构的观察,分析。换液两次,一次半小时。)之后可直接脱水包埋或放入 75%的乙醇4度可长期保存2.脱水:从75%的乙醇中取出,分别放到80%,90%,100%(Ⅰ)的乙醇中半小时,再放入100%乙醇中15min。固定完直接水洗包埋的,应从 70%乙醇开始,易碎组织从 50%乙醇开始。组织脱水时间不应过长,尤其是高浓度乙醇,要特别注意控制时间3.透明:透明的目的是置换组织内的脱水剂,为下一步浸蜡起到桥梁作用,二甲苯可以去除脂肪,乙醇+二甲米(1:1)2h:二甲苯(Ⅰ),二甲苯(Ⅱ)各10min(根据组织的大小和透明的难易程度不同,透明的时间回以根据具体情况调整,颜色浅的组织表面油亮,可以透过光时效果较好,颜色较深的组织至少边缘可以透光。类似于风干的杏肉。)4.浸蜡:浸蜡目的是置换组织中的透明剂,为包埋作准备。二甲苯+石蜡(1:1)2h;石蜡(Ⅰ)1h;石蜡(Ⅱ)2h。(浸蜡的时间也可以长一些)5.包埋:在冰盒上进行,将融好的纯蜡(最好提前4小时以上开始融蜡,新蜡更难融)倒入蜡盒(可以浸没组织就行,大约蜡盒的三分之一)由于蜡盒底部与冰盒接触,底部的蜡会先凝固,这样就可以把组织用镊子夹住立在底部。然后继续将蜡盒倒满,便干切片机夹住蜡块。待蜡块完全凝固,包埋完成。

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