ROS活性氧检测 DCFH-DA检测

考虑空白组可能存在污染，比如荧光剂污染就会出现空白组荧光强这个问题

加入DCFH-DA后，空白对照组的荧光很强，可能由以下几个原因导致：

1. 酯酶活性较高：DCFH-DA首先需要被酯酶裂解成DCFH，然后才能被氧化成DCF并发出荧光。如果空白对照组中的酯酶活性较高，可能会导致DCFH-DA迅速被裂解成DCFH，从而产生较强的荧光信号。

2. 自发性氧化：尽管空白对照组没有明显的氧化应激，但仍有可能存在一定程度的自发性氧化。在这种情况下，DCFH可能会自发地氧化成DCF，产生荧光信号。

3. 非特异性荧光：荧光信号可能来自非特异性结合。DCF与细胞内的氢离子结合形成DCF-H+复合物，而细胞内氢离子浓度可能受到其他因素的影响，如pH值、温度等。这些因素可能导致非特异性荧光信号的产生。

4. 探针降解：DCFH-DA可能在实验过程中发生降解，产生荧光信号。这种降解可能与温度、光照、氧化还原条件等因素有关。

ROS不稳定受影响因素太多了，严格避光避免外界环境刺激造成假阳性

DCFHDA 荧光探针的荧光强度容易受到细胞内环境的影响，如 pH 值、离子浓度等。