高山云初
如果特别少,应该是不可信,在样品制备和呈送过程需要注意以下几点:温度 湿度 光照 振动 污染
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从以下几点来提高样品质量:
1.样本收集方案:研究方案中应明确样本分组,每组样本数量,样本供体的纳排标准,每个样本的采集方法、体积/重量,现场前处理要求,储存条件,样本信息收集标准等内容,避免产生错误采集、混肴、交叉错配等问题。
2.耗材、储存、运输条件准备:离心管/离心机、现场前处理试剂、移液枪、封口膜、样本标签、干冰、保温厚泡沫箱、-20℃/-80℃冰箱等均应按标准准备到位,最好是知名品牌,并经过预试验验证,确保不会引入污染物;寻找有资质的冷链运输服务供应商提供样本运输服务,确保样本不变质。
3.样本采集人员要求:需经过系统培训,熟悉样本采集、现场前处理流程,操作规范、熟练,持证上岗。
4.样本分组原则:通过筛查关键理化指标、疾病诊断分类/分级,尽可能选择指标相近的样本归入同一组;若同时收集同一样本供体的2种以上样本(如血液、尿液),这2种样本最好配对归入同一样本集,如发现集;从而尽可能降低同组、同集样本间的个体差异。
5.样本处理人员要求:需经过系统培训,熟悉样本前处理流程,操作规范、熟练,持证上岗。
6.样本质量控制:确保样本按规程一次解冻、快速取样,避免反复冻融;通过外观、理化指标、光谱检测、SDS-PAGE凝胶分析等,剔除溶血、降解等不合格样本;同组样本随机筛选其中的20%,等量收集后混合,处理方法与实际样品一致,制备质控样品(QC)。
7.样本处理:不同类型的样本,如血液/尿液/组织等,需根据目标分子的性质、含量、干扰杂质等情况,设计、摸索、优化最佳前处理方法,以最大限度除去杂质、保留目标分子,或改变目标分子性质,适应检测方法,或提升目标分子的检测灵敏度;鉴于实验过程复杂、步骤多,需高效、熟练、有序地按流程处理样品,如移液时需避免上/下相交叉污染、避免气泡,避免引入偶然误差或污染物。
8.样品检测方法的建立与优化:参考已有文献和试验积累,建立样品分析检测方法,包括色谱类型、流动性选择,色谱梯度、流速、质谱检测参数设置等,并根据目标分子的检测灵敏度、准确性、重现性、与杂质的分离度等加以优化和验证,确定最佳样品分析检测方法。
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外部因素影响样品制备和呈送的主要有以下几点:1.温度:样品制备和呈送过程中,温度的变化会影响样品的性能,如果温度太高或太低,会使样品发生变质或失效。2.湿度:湿度也会影响样品的质量,如果湿度太高或太低,可能会影响样品的性能。3.光照:样品的制备和呈送过程中,光照的变化也会影响样品的性能,如果光照太强,可能会使样品发生变质。4.振动:样品的制备和呈送过程中,振动的变化也会影响样品的性能,如果振动太大,可能会使样品失效。5.污染:样品制备和呈送过程中存在污染,污染物会影响样品的性能,如果污染太大,可能会使样品发生变质或失效。
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