晓雨知春来
1. 液质系统使用洁净度和无颗粒物杂质的LC-MS级试剂。
试剂应当是在生产是采用0.2 μm进行预过滤的,但是不要在使用前再次过滤,这样会引入新的污染。
2. 使用超纯水
纯水系统的输出管路如果超过24小时没有水流动,需要打开冲洗20min,以排除微生物增殖。
3. 注意添加试剂的使用量
• 为了降低背景,使用最少量的、高质量流动相添加试剂(例如,添加0.1%的甲酸,而不是1%)。
• 添加试剂的使用可能会引入铁或者其他金属离子。例如乙酸可能包含有大量的金属离子。
• 避免使用无机盐或者在高有机相洗脱中加入添加试剂。这些试剂会在梯度结束时的高有机相产生沉淀。
• 在质谱中,避免使用不挥发性盐类试剂Na+,K+,PO43,推荐使用NH4+,乙酸、甲酸。注意,一些添加试剂与质谱不兼容,请根据各仪器厂商的说明。
• 当流动相的pH超过10,会溶解二氧化硅,所以如果系统中存在石英或者玻璃,避免溶液pH大于10。
高山云初
在实验中,可以通过以下方法避免将上述蛋白质污染物引入样品:1. 保持实验室清洁、减少灰尘和空气流动;2. 使用一次性过滤吸头;3. 定期清洗电泳、染色、微量离心机等设备,避免通过接触或气溶胶引入污染物颗粒;4. 穿戴洁净的实验服和手套。
sswei
实验中一定要佩戴手套,一定要仔细清洗染胶的容器(先用70%酒精洗,再用去离子水洗),切胶要带口罩,并在通风橱中进行。
周末也要努力呀
每一步都需要小心谨慎。最关键是样本制备过程中,尤其要非常注意。
毛利小五郎的徒弟
在质谱分析中,最常见的蛋白质污染物包括角蛋白和血清白蛋白。其他质谱(MS)蛋白污染物还包括酪蛋白和大肠杆菌蛋白质。
在实验中,可以通过以下方法避免将上述蛋白质污染物引入样品:1. 保持实验室清洁、减少灰尘和空气流动;2. 使用一次性过滤吸头;3. 定期清洗电泳、染色、微量离心机等设备,避免通过接触或气溶胶引入污染物颗粒;4. 穿戴洁净的实验服和手套。
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