原核表达未诱导的比诱导的的目的蛋白都多

是不是样品跑反了啊，拿错了？怎么可能未诱导的样品中目标蛋白这么明显的表达了？建议重新电泳。如果是不经过诱导就能表达出来这么高量的目标蛋白，简直神了。目标蛋白经鉴定正确，为啥会影响纯化呢。

可能有以下几点原因:

1. 载体或者插入片段存在问题,导致基因在无IPTG条件下也能发生一定的漏表达。

2. IPTG的浓度或诱导时间设置不当,导致蛋白表达量低。可以优化这两个参数。

3. 诱导组生长状况较差,虽然表达目的蛋白但总蛋白量相对较低。

4. 目标蛋白对IPTG存在一定的毒性,抑制了菌体正常生长。

5. 目标蛋白在IPTG诱导条件下加速降解,最终表达量受到影响。

6. 样本制备过程中损失了部分蛋白。

对后续的蛋白纯化主要影响在于目标蛋白的相对比例不同,IPTG诱导组目标蛋白相对比例可能比较低,这会降低纯化效率。

没有影响，载体pet28a IPTG 诱导0.2-0.6mM，菌体长到0.78OD时开始诱导，诱导温度37℃，诱导时间6小时，发现加了 IPTG 的诱导组菌体长得少，所以统一诱导组和未诱导组 OD 值，取菌液进行离心加上样缓冲液煮沸之后跑电泳。结果发现未诱导的比诱导的蛋白表达都高。蛋白条带预测40kDa，位置也对。