要曝光很长时间才能观察到荧光，原因是什么？

可能是染的荧光比较弱，表达量低；也有可能是在染荧光后没有使用荧光淬灭剂，荧光淬灭了；还有可能是拍的时间太久，导致荧光淬灭。

可能是感染时病毒加入量不够导致荧光基因未完全表达

可能是病毒自身荧光较弱，延长曝光时间即可

可能的原因有：

①显微镜汞灯使用时间长，可以通过对照病毒排除，若对照较亮可排除显微镜问题；

②pH值低，看培养基是否发黄，pH值较低会导致绿色荧光淬灭；

③目的病毒荧光不亮，插入目的基因后的病毒荧光强度会相较对照弱一些，属于正常现象，可加长曝光时间。