xin122
跑内参的时候用的15孔的梳子,跑了10组样品,但是显影出来只有6个条带,跑了好几次都有不同的条带丢失,不知道是哪里出了问题。
我的猜想:1.蛋白降解?
2.转膜时间过长?(我转了60min-90min)
3.三明治没夹紧?(我加了两层滤纸)
4.转膜有气泡?(我已经尽量排气泡了)
5.一抗孵育不均匀?
请大家帮忙解答一下,我实在迷惑。
balalaLy
你列举的5点可能的问题中2-5的可能性不大,因
为不会这么刚刚好只出现一个孔的条带不见了。很可能是你的蛋白降解或者浓度特别低
毛利小五郎的徒弟
看条带考虑还是蛋白降解,注意控制温度,不要太高
NatureBios
按照你的描述,多次,而且是各不相同泳道样本,蛋白印迹不出,这个现象属于操作上的因素,转好的膜丽春红染色,查看电泳和转印的效果,转印时夹子夹好,赶走气泡,抗体孵育不均(孵育时,印迹膜泡在抗体稀释液中)