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泛素化实验问题——泛素化条带不均匀

相关实验:蛋白质泛素化分析

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伊童RW

实验求助:做泛素化实验次数很多,但条带总是不稳定,我是转染HA-Ub,孵HA抗体显示泛素化。有时候一条里是均匀的,但有时候条带看上去一片一片的深浅不一,换了转膜的膜也还是有这样的问题。转膜的操作一直都是一样的,孵条带就没问题,底物都能正常孵出来,而且不存在这样缺失的问题。究竟是为什么啊?好绝望!求大神鼎力相助!

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3 个回答

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灵枢天问

有帮助

这看起来像是显影剂没铺上或者转膜没转到

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balalaLy

有帮助

你这个单一条条带是一片的,可能是胶的问题,可以换梯度胶试一下,我以前也是换用梯度胶跑的话会很好看。其次是曝光的膜上白色的部分像是有一个光圈的样子,好不好是显影机子的问题

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bamboopiggy

有帮助

感觉前两个图是转膜没转好。最后一个图,看着还可以。

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