新手co-ip相关实验遇到的三个问题。希望能得到大佬的帮忙，万分感谢
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1.跑ip发现in put组发不出来条带，实验组有条带
2.in put组条带和实验组发出来的条带位置不一样
3.我想拉的蛋白离igG重链特别近，我要怎么样规避重链的影响啊，用flag做可以吗
我是ip新手，这三个问题最近在做ip实验的时候总是碰到，非常希望能够得到各位大佬的帮助，万分感谢
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3 个回答
汤姆卜丽波
有帮助
input出不来可能是试剂准备上就有问题，也有可能蛋白不表达，而位置不同可能是收到了重链的干扰。避免干扰可以使用IPkine二抗，增加Input和IP泳道上样量，减少曝光时间，以及阴性对照IgG使用量建议调整到1ug以下。
天一湖医者
有帮助
input可能因为蛋白含量不高，所以没有显示出来。
秋秋欣欣
有帮助
1.发不出条带可能是蛋白量，珠子以及抗体需要调整
2.条带位置改变可能是蛋白的相互作用力的结果，或者是高温导致的迁移
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