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IP的阴性对照组IgG中出现了目的条带,是我提的蛋白不纯吗,还是其他地方出了问题

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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dxy_orb5hq6r

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6 个回答

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周末也要努力呀

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IP的阴性对照组是用于检测实验中是否存在假阳性结果的对照组。如果阴性对照组中出现了IGG条带,可能有以下几种原因:


1. 检测方法的问题:检测方法可能存在一些技术问题,例如试剂盒的质量不佳、操作不当等,导致阴性对照组出现了假阳性结果。


2. 试剂的污染:试剂可能被污染,例如试剂盒的存储条件不佳、试剂的过期等,导致阴性对照组出现了假阳性结果。


3. 样本的污染:样本可能被污染,例如样本的采集、保存、处理等环节存在问题,导致阴性对照组出现了假阳性结果。


4. 实验设计的问题:实验设计可能存在问题,例如实验中的阴性对照组没有正确设置,导致阴性对照组出现了假阳性结果。


因此,在实验中出现阴性对照组出现IGG条带的情况,需要仔细排查以上可能的原因,并进行相应的措施进行纠正。

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米米米小喵

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加入的A蛋白抗体和IgG 抗体,在最后一步的煮样中,被β巯基乙醇破坏了结构,变成了重链和轻链,随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同,又被你的B蛋白抗体识别出来,所以显影就出现了条带。

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异乡人hyq

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IgG如无特殊情况,是阴性对照,非特异性的IgG抗体,一般不会pull down什么东西下来,也就一般不会有条带,如果有条带说明目的蛋白与beads本身有结合或与IgG有非特异性结合,或用了这个IgG对应的二抗(应该不至于吧)。

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Eason老歌迷

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原因可能是没洗干净,也可能是目的蛋白可以与IgG或珠子非特异性结合。

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未来9

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可能是抗体的问题或者样品浓度过高,可以换IgG抗体或者稀释样品

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bamboopiggy

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ip阴性有非特异性结合,只要你实验组出的条带比igG组高就可以

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